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Una composición que comprende un anticuerpo purificado, o fragmento de unión a antígeno o inmunoconjugado del mismo, en el que dicho anticuerpo: (a) comprende una región variable de cadena pesada que incluye los restos de aminoácidos de las regiones determinantes de la complementariedad (CDR) de las posiciones de aminoácidos 31-35 (CDR H1), 50-56 (CDR H2) y 95-102 (CDR H3) de la SEC ID Nº: 2, y una región variable de cadena ligera que incluye los restos de aminoácidos de las CDR de las posiciones de aminoácidos 24-34 (CDR L1), 50-56 (CDR L2) y 89-97 (CDR L3) de la SEC ID Nº: 4; (b) se une a fosfatidilserina en un ELISA realizado en presencia de suero al 10 % y comprende una región variable de cadena pesada que incluye la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 2; o una región variable de cadena ligera que incluye la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 4; o (c) se une a fosfatidilserina en un ELISA realizado en presencia de suero al 10 % y comprende una región variable de cadena pesada que incluye una variante o forma mutagenizada de la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 2; en la que dicha variante o forma mutagenizada tiene una identidad de secuencia de aminoácidos de al menos aproximadamente 96 % con la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 2; y una región variable de cadena ligera que incluye una variante o forma mutagenizada de la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 4, en la que dicha variante o forma mutagenizada tiene una identidad de secuencia de aminoácidos de al menos aproximadamente 96 % con la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 4; y en la que dicho ELISA tiene el protocolo: la placa de 96 pocillos se recubre con fosfatidilserina (FS) de la siguiente manera: - diluir la solución madre de FS en n-hexano a 10μg/μl y mezclar bien - añadir 50μl a cada pocillo y permitir que éste se evapore durante una hora añadir a cada pocillo 200μl de tampón de bloqueo, donde dicho tampón de bloqueo es suero bovino al 10 % disuelto en PBS, cubrir y conservar a temperatura ambiente durante 2 horas o durante una noche a 4 ºC lavar la placa tres veces con PBS añadir anticuerpo primario a la muestra de ensayo diluido en dicho tampón de bloqueo e incubar durante 2 horas a 27 ºC lavar la placa tres veces con PBS añadir 100μl/pocillo de anticuerpo secundario (anti-IgG de ratón, de cabra, conjugado con HRP u otro anticuerpo secundario apropiado) e incubar durante 1 hora a 37 ºC lavar la placa tres veces con PBS revelar el ELISA añadiendo 100μl de solución reveladora a cada uno de los pocillos, revelar durante 10 minutos, después añadir a cada pocillo 100μl de solución determinación y leer la densidad óptica 490 nm siendo la solución reveladora Na2PO4 0,2 M, 10 ml de ácido cítrico 0,1 M y un comprimido de 10 mg de o-fenilendiamina y 10μl de peróxido de hidrógeno siendo la solución de terminación H2SO4 0,18 M. |
