粉防已的种子组培繁殖方法

摘要

本发明公开了一种粉防已的种子组培繁殖方法，包括种子储藏、种子消毒、启动培养、诱导培养、增殖培养、生根培养六大步骤，其特征在于，诱导培养步骤中，首先采用诱导培养基一对萌动膨大的种子进行培养，诱导出无菌苗，然后采用诱导培养基二对无菌苗进行继续培养，从而降低了丛生芽的褐化率并消除了丛生芽的部分玻璃化现象。在增殖培养步骤中采用两步增殖培养，第一步可以快速培养出大量的丛生芽，第二步可以培养出用于生根的健壮丛生芽苗以及部分新增殖的丛生芽，有效的提高本组培方法的繁殖效率，本发明方法培养流程简单，繁殖系数高，操作方便，适宜工厂化育苗，为商业化培养粉防已种苗提供了技术支持。

主权项

粉防已的种子组培繁殖方法，包括种子储藏、种子消毒、启动培养、诱导培养、增殖培养、生根培养六大步骤，其特征在于，所述启动培养是指：将消毒好的种子接种到MS培养基上，在夜温18℃，日温22℃，相对湿度50％～60％暗箱条件下进行种子启动培养，15天后，种子开始萌动膨大；所述诱导培养是指：将萌动膨大的种子接种于诱导培养基一中培养，其中，诱导培养基一为MS+BA2.0—3.0mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH值为5.8，培养条件为：光照强度1500LX，光照12h，温度22～26℃，培养4～6周，萌动膨大的种子萌发为无菌苗；将无菌苗分切成1‑3mm的块茎段置于诱导培养基二中培养，其中诱导培养基二为MS+Ca(NO₃)₂200mg/L+BA1.0—2.0mg/L+IAA0.2mg/L+VC10‑20mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH值为5.8，培养条件为：光照强度1500LX，光照12h，温度22～26℃，培养4周，即可诱导出大量的丛生芽；所述增殖培养是指：将生长至5mm以上的丛生芽切下接种于增殖培养基一中，增殖培养基一为MS+Ca(NO₃)₂200mg/L+BA1.0mg/L+IAA0.5mg/L+VC10‑20mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH值为5.8，培养条件为：光照强度1500LX，光照12h，温度22～26℃，培养4周，可观察到大量新增殖的丛生芽；将1cm以上的丛生芽丛切割成2‑5mm的芽丛块接种于增殖培养基二中，增殖培养基二为MS+Ca(NO₃)₂200mg/L+IBA2.5mg/L+IAA2.0mg/L+VC10‑20mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH值为5.8，培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照12h，温度22～26℃，培养4‑8周，获得部分长成2～4cm的健壮丛生芽苗以及部分新增殖的丛生芽。