发明名称 |
一种葡萄果皮RNA的提取方法 |
摘要 |
本发明公开了一种葡萄果皮RNA的提取方法,属生物技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种成本较低、效率较高的葡萄果皮RNA的提取方法。本发明所提取的葡萄果皮RNA的方法包括如下步骤:称取0.2g葡萄果皮,液氮研磨后加入预热的裂解液和β-巯基乙醇,涡旋后水浴,加等体积氯仿/异戊醇(24/1)震荡后离心,取上清加等体积的氯仿/异戊醇(24/1)后再离心,重复2次,加入沉淀剂沉淀后离心,乙醇洗涤并回收RNA。 |
申请公布号 |
CN104164421A |
申请公布日期 |
2014.11.26 |
申请号 |
CN201410401946.9 |
申请日期 |
2014.08.14 |
申请人 |
镇江万山红遍农业园 |
发明人 |
任俊鹏;郭建;刘照亭;刘伟忠;毛妮妮;刘吉祥;鲁群 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 |
代理人 |
龚燮英 |
主权项 |
一种葡萄果皮RNA的提取方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将待用的CTAB裂解液放置在65‑70℃水浴中预热10min;(2)取0.2g葡萄果皮,在研钵中用液氮研磨成粉末状后,盛入2ml离心管内;(3)吸取1ml预热过的CTAB裂解液到2ml离心管内,加入20μlβ‑巯基乙醇,缓慢震荡混匀后,放回到65‑70℃水浴中,水浴45‑50min,期间反复颠倒混匀2‑3次;(4)水浴完成后,将上述样品液加入等体积的氯仿/异戊醇并涡旋混合,12000rpm,4℃离心10min;(5)吸取一定量上清液至新的2ml离心管内,重复步骤(4)抽提二次;(6)吸取一定量上清液至一新的1.5ml离心管中,加入‑20℃预冷的LiCl溶液,‑20℃下沉淀过夜;(7)4℃,12000rpm离心20‑30min,弃上清,用500μl70%乙醇洗涤沉淀2次,4℃,12000rpm离心30s;(8)用500μl100%乙醇洗涤沉淀,4℃,12000rpm离心30s;(9)吸干残留上清,干燥15min后,用30μlDEPC水溶解RNA。 |
地址 |
212400 江苏省镇江市句容市宁杭路112号 |