基于DNA条形码的鉴别金钱白花蛇的引物及PCR-RFLP方法和试剂盒

摘要

本发明属于中药品种鉴定技术领域，提出一种鉴别金钱白花蛇及其伪品的聚合酶链反应-限制性酶切图谱分子鉴定方法，用限制性内切酶Spe I和BstE II分别识别并切割金钱白花蛇的特征DNA碱基序列，将金钱白花蛇DNA条形码COI片段酶切成三条片段。本发明鉴定过程：样品DNA提取；引物DK1-CO1、DK1-CO2进行PCR扩增；纯化PCR产物；限制性内切酶Spe I和BstE II消化PCR产物；琼脂糖凝胶电泳分析结果；通过与金钱白花蛇PCR-RFLP特征结果比较，判断供试品是否为金钱白花蛇。本发明还提出用于所述鉴别方法的试剂盒。本发明方法准确、快速、可靠，可广泛应用于中药材鉴定。

主权项

用于鉴别金钱白花蛇PCR‑RFLP方法的PCR扩增引物，其特征在于，所述引物序列为：DK1‑CO1：5’‑CAACTAACCACAAAGACATCGG‑3’；DK1‑CO2：5’‑CTTCTGGGTGGCCGAAAAATCA‑3’。