一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法

摘要

本发明涉及一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法。属于荧光蛋白发光特性技术领域。其特征在于包括下述步骤：1)从海洋红藻中分离纯化出藻红蛋白，2)用紫外-可见光光度计测定获得的藻红蛋白纯化液在280nm、565nm和625nm波长的吸光值，所获得的藻红蛋白纯化液的纯度比值A₅₆₅/A₂₈₀应大于4.5；纯度比值A₆₂₅/A₅₆₅应小于0.03，3)采用荧光分光光度计，在498nm的激发波长光下，测定藻红蛋白纯化液在576nm波长时发射的荧光强度值A.U，4)采用公式μ_f＝A.U/[(A₅₆₅/0.1)×V_f]计算藻红蛋白的比荧光强度μ_f。根据获得的比荧光强度数值可准确、合理地比较任何藻红蛋白样品的荧光性能。

主权项

一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法，其特征在于：从海洋红藻中分离纯化出的高一种高纯度藻红蛋白比荧光强度的计算方法，其特征在于：从海洋红藻中分离纯化出的高纯度藻红蛋白作为测试样品；用紫外‑可见光光度计测定获得的藻红蛋白纯化液在280nm、565nm和625nm波长的吸光值，所获得的藻红蛋白纯化液的纯度比值A₅₆₅/A₂₈₀应大于4.5；纯度比值A₆₂₅/A₅₆₅应小于0.03，采用荧光分光光度计，在498nm的激发波长光下，测定藻红蛋白纯化液在576nm波长时发射的荧光强度值A.U；采用公式μ_f＝A.U/[(A₅₆₅/0.1)*V_f]计算藻红蛋白的比荧光强度。式中μ_f是比荧光强度值，A.U指采用荧光光度计，以498nm波长光作为激发光(λex＝498nm)，测定得到的藻红蛋白纯化液在最大发射波长(λem＝576nm)下的荧光强度值。A₅₆₅指采用紫外‑可见光光度计测定的高纯度藻红蛋白纯化液在565nm波长光下的吸光值。V_f指采用荧光光度计测定藻红蛋白的荧光发射强度时吸取的高纯度藻红蛋白纯化溶液的微升数。