快速检测肌钙蛋白I的胶体金试纸及其制备方法

摘要

本发明涉及临床免疫学检测领域，具体涉及一种快速检测肌钙蛋白I胶体金试纸条及其制备方法。本发明提供的试纸条，其为在底板上依次相互交错地粘贴包被膜、喷涂有胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I抗体的胶体金垫1、喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2、样品垫和吸水垫，所述的包被膜涂覆有抗心肌肌钙蛋白I抗体检测线和兔抗鼠抗体质控线。通过对试纸条的改进，首次将抗PEG技术和抗BSA单克隆抗体技术引入心肌肌钙蛋白I的检测中，大大提高了心肌肌钙蛋白I的检测灵敏度，扩大了现有胶体金快速诊断试纸条的临床应用。

主权项

一种快速检测心肌肌钙蛋白I胶体金试纸条，其包括包被膜、喷涂有胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的胶体金垫1、喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2、样品垫、吸水垫和底板，所述的包被膜涂覆有抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体检测线和兔抗鼠抗体质控线；与所述喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体的胶体金垫2配套使用的胶体金垫1的制备方法为：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.1％～5％的BSA溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时；与所述喷涂有胶体金标记的抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2配套使用的胶体金垫1的制备方法为：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.01％～1％的PEG20000溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时；所述喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体的胶体金垫2的制备方法为：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗BSA单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.01％～1％的PEG20000溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时；所述喷涂有胶体金标记的抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2的制备方法为：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗PEG20000单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.1％～5％的BSA溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA、0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时；所述包被膜的制备方法为：将抗心肌肌钙蛋白I抗体稀释液和兔抗鼠抗体稀释液喷涂于硝酸纤维素膜上，烘干备用；所述样品垫的制备方法为：用样品垫溶液处理后烘干备用；所述试纸条的制备方法为：在底板上依次相互交错地粘上制备的样品垫、胶体金垫1、胶体金垫2、包被膜、和吸水垫，然后在上面覆盖透明塑料密封膜得到试纸。