发明名称 多重核酸检测方法和系统
摘要 本发明涉及基于单分子克隆扩增和后续检测核酸分子的方法和系统,且本发明尤其涉及判断单核苷酸多态性(SNPs)、突变和诊断与这些核酸分子变化有关的疾病。
申请公布号 CN102625850B 申请公布日期 2014.11.26
申请号 CN201080024654.8 申请日期 2010.04.02
申请人 蒂莫西·Z·刘 发明人 蒂莫西·Z·刘
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 代理人 徐金国
主权项 一种用于判断多个标识序列标签的标识码的方法,所述方法包含以下步骤:(a)在一表面上固定多个分析物分子,其中每一个分析物分子包含一标识序列标签,所述标识序列标签的长度小于10个碱基,且所述标识序列标签可与探针进行杂交;(b)将来自标记的标识序列探针库的一对标记的标识序列探针与所述标识序列标签的碱基审视位置处进行杂交,进而并置所述一对标记的标识序列探针,其中每一个所述标记的标识序列探针包含:(i)与所述探针杂交的所述标识序列标签序列互补的序列,以及(ii)与所述碱基审视位置处的指定碱基相关的检测标记,其中在每一个标记的标识序列探针库中存在两组探针,其中一组为3'端标记的标识序列探针,所述3'端标记的标识序列探针包含5'端磷酸基和3’端标记,且另一组为5'端标记的标识序列探针,所述5'端标记标识序列探针包含5'端标记和3'端羟基;(c)进行成对探针连接步骤,以连接所述一对并置的标记的标识序列探针;(d)在所述分析物分子的所述标识序列标签上检测所述一对连接的标记的标识序列探针上所述检测标记的存在,且根据所述一对连接的标记的标识序列探针的所述检测标记组合,判定所述标识序列标签的所述碱基审视位置处的碱基组成,且审视所述标识序列标签上的两个指定碱基位置,包括在所述一对连接的标记的标识序列探针的每一侧上的一个所述指定碱基位置;(e)使所述一对连接的标记的标识序列探针变性而脱离所述分析物分子;(f)重复步骤(b)至步骤(e),直到不重复地审视所述标识序列标签中的所有碱基审视位置处的所有碱基,且判定所述标识序列标签的所有碱基组成为止;和(g)通过比较所述碱基组成与预定标识码,判断所述分析物分子上的所述标识序列标签的所述标识码,以在n个成对探针连接循环中区别10^n个碱基组成。
地址 美国加利福尼亚州