一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法

摘要

本发明公开了一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法，步骤包括：(1)白蜡总DNA提取，(2)SSR序列PCR扩增，(3)PCR扩增产物电泳、染色及鉴定；其中：步骤(2)公开的4对SSR引物组合即可将白蜡DNA进行PCR扩增，获得扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测条带差异性明显的结果，并以此构建了白蜡种的SSR指纹图谱。本发明方法从分子水平上对白蜡种质资源进行了准确鉴定，解决了白蜡种质鉴定困难的问题，且检测时间短、重复性好、准确性高、在收集的12个种中具有专一性。

主权项

一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法，步骤包括：(1)白蜡总DNA提取，(2)SSR序列PCR扩增，(3)PCR扩增产物电泳、染色及鉴定；其中：步骤(1)所述的白蜡总DNA提取，采用CTAB法，步骤(3)所述PCR扩增产物电泳采用6％聚丙烯酞胺凝胶电泳，染色采用银染法染色，鉴定采用统计电泳带型，构建供试材料SSR指纹图谱，进行白蜡种质鉴定；其特征在于：步骤(2)所述SSR序列PCR扩增是以步骤(1)提取的白蜡总DNA样品为模板，采用如下4对引物进行SSR‑PCR扩增：引物对1：上游：5‘TGTTCGGTTTCCTTGCTC’3下游：5‘AAAGAGGGCTGCTGGAGT’3；引物对2：上游：5‘ACTTGTAATGCTGGGAGG’3下游：5‘AATTCCAGTGGTAGAGGC’3；引物对3：上游：5‘TGGTGGAAACAAGATGGG’3；下游：5‘CTCGGGACAGAATGGATG’3引物对4：上游：5‘AGCAGCATTTATGAATGTTC’3下游：5‘ATCAACTGAAGATGACGACG’3。