摘要 |
Способ получения бруцеллезного L-антигена, включающий культивирование штамма Brucella abortus 19 в L-форме на плотной питательной среде, приготовленной на основе мясо-пептонного печеночного глюкозо-глицеринового агара (1,3-1,5% агара) с добавлением 10-15% нормальной лошадиной сыворотки и стрептомицина в дозе 2,5-5,0 ЕД/мл при 37-38°C в течение 4-5 суток, полученную в L- форме культуру смывают физиологическим раствором, инактивируют при 85-90°C в течение 60 мин, отличающийся тем, что взвесь центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 мин, надосадочную жидкость убирают, а осадок дважды промывают физиологическим раствором, центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 мин, к бактериальной массе добавляют расплавленный фенол в соотношении 1:1 и растирают пестиком на водяной бане в течение 20-30 мин при температуре 55-60°C, физиологическим раствором доводят раствор фенола до 5%, фенольную суспензию центрифугирую при 5000-10000 об/мин 30-40 мин, надосадочную жидкость отстаивают и используют в качестве антигена, полученный антиген титруют, стандартизируют по специфичности и активности и используют для реакции связывания комплемента в серологической диагностике бруцеллеза. |