发明名称 一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用
摘要 本发明公开了一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用,其步骤:A、<i>Streptomycessahachiroi</i>ATCC33158中<i>aziD2</i>基因缺失突变株构建:将用于缺失<i>aziD2</i>基因的重组质粒导入到野生型菌株,获得<i>aziD2</i>基因缺失突变菌株,其总DNA能扩增出1.0kb的特征带;B、<i>aziD2</i>基因表达质粒的构建:<i>aziD2</i>基因表达质粒的构建是基于链霉菌表达质粒进行,用<i>Xba</i>I+<i>Spe</i>I酶切处理<i>aziD2</i>基因片段后,以正确的方向插入到载体组成型强启动子P<i>ermE*</i>下游的<i>Xba</i>I位点上,获得<i>aziD2</i>基因的表达质粒;C、<i>aziD2</i>基因互补表达菌株的构建:通过接合转移的方法将<i>aziD2</i>基因表达质粒导入到<i>aziD2</i>基因缺失的菌株中,以互补菌株的总DNA为模板,扩增出1.1kb的特征带,得到互补<i>aziD2</i>基因的菌株WSD2CP。方法易行,操作简便,增强该基因的表达量,从而提高了阿嗪霉素B的产量。
申请公布号 CN103374541B 申请公布日期 2014.11.19
申请号 CN201210110348.7 申请日期 2012.04.16
申请人 华中农业大学 发明人 何璟;王珊
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/465(2006.01)N 主分类号 C12N1/21(2006.01)I
代理机构 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人 王敏锋
主权项 一种阿嗪霉素的基因工程菌WSD2CP,其特征在于:Streptomyces sahachiroi菌株WSD2CP,CCTCC,CCTCC M2012098。
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