一种基于荧光共振能量转移检测双酚A的方法

摘要

本发明公开了一种基于荧光共振能量转移（FRET）检测环境激素中BPA的方法，属于分析化学领域，是采用有机荧光染料FAM作为FRET的供体分子、TAMRA作为FRET的受体分子，利用BPA适配体与BPA特异性结合的原理，利用荧光共振能量转移技术检测BPA的含量。该方法在BPA浓度为1.0×10^-10-1.0×10^-8mol/L范围内呈良好的线性，最低检测限可达7.0×10^-11mol/L，其检测限大大低于国家卫生标准中对碳酸酯树脂和成型品中酚溶出量的要求，可准确测定水壶、水杯、奶瓶、食品容器等橡塑制品中BPA的含量。

主权项

一种基于荧光共振能量转移检测BPA的方法，是基于BPA适配体与BPA特异性结合的原理，利用荧光共振能量转移检测BPA的含量；包括以下步骤：1）将DNA以8000 r/min的转速离心5 min后，加入50 mmol/L、pH值为7.4的BR缓冲液中充分振荡5‑10 min，放入4℃冰箱备用；2）将步骤1）中的DNA加入到50 mmol/L、pH值为7.4的BR缓冲液中，再加入D1、T1和T2，杂交反应2 h；3）检测步骤2）反应后溶液的荧光信号，记为初始荧光信号值F₀；4）向步骤3）检测后的溶液中加入待测溶液，特异性结合10 h；5）检测步骤4）反应后溶液的荧光信号，记为反应荧光信号值F；6）根据BPA浓度与荧光强度变化值的线性方程计算出BPA的浓度，进而得出待测溶液中BPA的含量。