发明名称 利用秀丽隐杆线虫鉴定白酒中塑化剂的方法
摘要 利用秀丽隐杆线虫鉴定白酒中塑化剂的方法,它涉及一种鉴定塑化剂的方法。本发明解决了常规的塑化剂检测方法中操作复杂、仪器依赖度大、成本高的技术问题。本方法如下:一、配制胆固醇乙醇溶液;二、配制磷酸盐缓冲液;三、制备线虫培养基;四、向线虫培养基中均匀涂入大肠杆菌OP50菌液,于37℃培养8~12h,接入8~12条性成熟的秀丽隐杆线虫,培养24h并观测产卵数量,秀丽隐杆线虫产卵数低于正常水平,则证明待检白酒含有塑化剂。本检测方法对实验条件要求低,不需要特殊的高精分析仪器和检测设备,实验操作方便,成本低廉,易于掌握。
申请公布号 CN103076444B 申请公布日期 2014.11.19
申请号 CN201310002411.X 申请日期 2013.01.04
申请人 中国科学院东北地理与农业生态研究所 发明人 王云彪
分类号 C12Q1/02(2006.01)I 主分类号 C12Q1/02(2006.01)I
代理机构 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 代理人 王艳萍
主权项 利用秀丽隐杆线虫鉴定白酒中塑化剂的方法,其特征在于利用秀丽隐杆线虫鉴定白酒中塑化剂的方法如下:一、称取1.0g胆固醇,溶于无水乙醇中,配制成浓度为10mg/mL的胆固醇乙醇溶液;二、配制磷酸盐缓冲液:称取13.6g KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>、1.8g KOH,加蒸馏水定容至100mL,调节pH值为6.0;三、将15~20g琼脂粉、2~3g蛋白胨、0.10~0.12g CaCl<sub>2</sub>、0.11~0.13g MgSO<sub>4</sub>和2~3g NaCl加入到1000mL的烧杯中,加入1mL胆固醇乙醇溶液和25mL磷酸盐缓冲液,用蒸馏水定容至1000mL;四、将烧杯封口,放入高压蒸汽灭菌锅中于120℃灭菌15~25min,然后降温至50~60℃,在无菌环境下加入0.5~5mL待测白酒,然后将混合物在无菌环境下倒入6cm培养皿中,在温度为20℃的无菌环境下干燥8h~12h,即得线虫培养基;五、向线虫培养基中均匀涂入浓度为1×10<sup>9</sup>个/mL~2×10<sup>9</sup>个/mL大肠杆菌OP50菌液0.8~1.2mL,于37℃培养8~12h,接入8~12条性成熟的秀丽隐杆线虫,培养24h并观测产卵数量,秀丽隐杆线虫产卵数低于正常水平,则证明待检白酒含有塑化剂。
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