用于核酸恒温扩增反应中防止核酸污染和指示其反应结果的方法

摘要

本发明提供了一种用于核酸恒温扩增反应中防止核酸污染和指示反应结果的方法。以LAMP反应为例，用熔点为40-60℃的全精炼石蜡或半精炼石蜡，利用其在LAMP反应温度（60-65℃）时为液态，反应结束后冷却至室温又恢复为固态的原理来防止污染。可通过浊度来判断结果，或通过指示剂来指示恒温扩增反应结果。本发明采用容易配制的特殊熔点蜡块，价格低廉，固态封闭效果好，可永久封闭，从而避免了扩增物受到污染，有效防止核酸恒温扩增反应结果的假阳性，适用于所有核酸恒温扩增反应。

主权项

环介导恒温扩增技术(LAMP)核酸检测中防止核酸污染的方法，包括以下步骤：1)将熔点为44‑60℃的全精炼固态石蜡或半精炼固态石蜡融化后导入模具后再降温使其凝固，将石蜡制成适用于反应管大小，即直径与反应管管径相同，的柱状固态石蜡块；2)在反应管中将LAMP反应液混合好，将石蜡块加入到反应液的上方；3)盖上盖，将反应管置于60‑65℃恒温容器中进行环介导恒温扩增反应，在反应温度下固态石蜡块融化成为液态石蜡覆盖在反应液上表面，使反应液在封闭状态下进行反应；4)反应结束后，冷却至室温，待液态石蜡恢复为固态后用浊度仪进行结果判读。