林蛙提取冻干粉及其在制备治疗痤疮的药物及化妆品中的应用

摘要

一种林蛙提取冻干粉及其在制备治疗痤疮的药物及化妆品中的用途，属于生物制药技术领域。是将林蛙干除杂除尘后粉碎，再加入复合酶水解液，取离心后的上层上清液；将剩余混合物研磨后剪切，喷雾干燥成粉末状，将该超微粉加入到醋酸中超声后纱网过滤，离心后取上清液减压浓缩；从而得到多糖、抗菌肽和钙离子的混合物；将上述物质混合得到林蛙提取混合液，经预冻、升华、解吸、后处理得到林蛙提取冻干粉。冻干粉是纯生物制剂，无任何副作用，所含短肽胶原蛋白在多糖的作用下可更好的进入正常细胞，给予细胞充足营养，并可修复受损细胞；抗菌肽可结合钙离子，增强其对细菌细胞壁的破坏，并进入细菌细胞达到抑菌效果。

主权项

一种林蛙提取冻干粉，其特征在于：含有短肽胶原蛋白、多糖、抗菌肽和钙离子，且按照下述步骤制备得到：(1)将林蛙干除杂除尘后依次经20～100目粉碎，使林蛙干粉碎物的粒径在500μm以下，按照1g：1～10mL的比例加入复合酶水解液，复合酶水解液中含木瓜蛋白酶1～5wt％、胰蛋白酶2～4wt％，风味蛋白酶1～3wt％；在50～55℃下酶解1～2h，酶解pH为7.0～7.5，而后在85～90℃、5～15min灭酶；再将混合物在10～30℃离心，离心时间为1～5min，离心转速为2000～4000rpm，取离心后混合液体积20～40％的上层上清液，此时上层上清液中含有林蛙干短肽胶原蛋白；(2)将上述取上层上清液后的剩余混合物放入胶体磨，研磨2～15min，使混合物的平均粒径在300μm以下；将研磨后的混合物放入高剪切分散乳化机内，剪切1～15min，使混合物平均粒径在100～200μm之间；再将剪切后的混合物喷雾干燥成粉末状，得到超微粉；将该超微粉加入到质量浓度为2～10％醋酸中超声，醋酸与超微粉的体积质量比为10～40mL：1g，超声时间为5～75min，超声温度为4～30℃；再经150μm纱网过滤，纱网上面未过滤物质再加入质量体积比为1g:1～8mL、浓度为0.01～0.03mol/L的氢氧化钠，进行微波提取，微波功率为500～600W，微波提取时间为3～9min，再次经150μm纱网过滤；合并两次滤液，30～50℃搅拌10～30min，搅拌速度为100～200rpm；将搅拌后的滤液离心，离心温度为4～30℃，离心时间为2～40min，离心转速为2000～15000rpm；取上清液减压浓缩，压力为600～700托，温度为65～70℃，浓缩体积比为8～40：1；从而得到多糖、抗菌肽和钙离子的混合物；(3)将步骤(1)得到的短肽胶原蛋白和步骤(2)得到的多糖、抗菌肽、钙离子混合，得到林蛙提取混合液；(4)将上述林蛙提取混合液经过预冻、升华、解吸处理后得到林蛙提取冻干粉。