用于失活α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达的方法和组合物

摘要

本文公开了使用包含锌指蛋白和切割结构域或切割半结构域的融合蛋白来失活FUT8基因的方法和组合物。还提供了编码所述融合蛋白的多核苷酸，以及包含所述多核苷酸和融合蛋白的细胞。

主权项

一种结合FUT8基因的锌指DNA结合结构域，其中所述DNA结合结构域包含4个、5个或6个锌指识别区，从N末端至C末端顺序为F1至F4、至F5或至F6，(i)当所述锌指DNA结合结构域包含4个锌指识别区时，其中依次编号为F1、F2、F3和F4的锌指选自：F1:QSSDLSR(SEQ ID NO:9)，F2:TSGNLTR(SEQ ID NO:10)，F3:RSDDLSK(SEQ ID NO:11)，和F4:DRSALAR(SEQ ID NO:12)；或F1:RSDVLSA(SEQ ID NO:14)，F2:QNATRIN(SEQ ID NO:15)，F3:DRSNLSR(SEQ ID NO:16)，和F4:RLDNRTA(SEQ ID NO:17)；(ii)当所述锌指DNA结合结构域包含5个锌指识别区时，其中依次编号为F1、F2、F3、F4和F5包含：F1:RSDNLRE(SEQ ID NO:26)，F2:NNTQLIE(SEQ ID NO:27)，F3:TSSILSR(SEQ ID NO:28)，F4 RSDNLSA(SEQ ID NO:29)，和F5:RKDTRIT(SEQ ID NO:30)；(iii)当所述锌指DNA结合结构域包含6个锌指识别区时，其中依次编号为F1、F2、F3、F4、F5和F6包含以下氨基酸序列：F1:RSDNLSV(SEQ ID NO:19)，F2:QNATRIN(SEQ ID NO:15)，F3:RSDNLST(SEQ ID NO:20)或RSDHLSQ(SEQ ID NO:24)，F4:QSATRTK(SEQ ID NO:21)，F5 RSDNLSR(SEQ ID NO:22)，和F6:RNDNRKT(SEQ ID NO:23)。