一种用膜透性法验证蕨类植物配子体化感作用的方法

摘要

本发明是一种用膜透性法验证蕨类植物配子体化感作用的方法，包括如下步骤：一、蕨类配子体膜透性数据收集与分析；二、化感作用对植物膜透性变化的验证。本发明的优点：可快速、直接、有效、目的明确的判断化感作用对植物的生理变化的响应，特别是对蕨类配子体的膜透性的影响。

主权项

一种用膜透性法验证蕨类植物配子体化感作用的方法，其特征是该方法包括如下步骤：一、蕨类配子体膜透性数据收集与分析；二、化感作用对植物膜透性变化的验证；所述的步骤一、蕨类配子体膜透性数据收集与分析；具体包括，1、实验材料准备：DDS‑307雷磁直读电导率仪；一次性塑料培养皿15皿；预培养20天的井栏边草配子体；2、实验处理设计：1）取预培养20天的井栏边草配子体，放入10mL质量浓度为0.1g/mL的三叶鬼针草叶的水提液，并设置体积浓度梯度分别为100%、50%、25%、12.5%以及空白组，转移入一次性塑料培养皿中，每皿100枚配子体，每组体积浓度梯度有三个平行组；实验时间为10天，在第2、4、6、8、10天进行井栏边草配子体的膜透性的测定；2）校准DDS‑307雷磁直读电导率仪：将电极放入注入30mL的去离子水的50mL高悬杯中，把DDS‑307雷磁直读电导率仪“选择”开关指向“检查”，“常数”补偿旋钮指向“1”刻度线，“温度”补偿旋钮指向“25”度线，调节“校准”调节旋钮，使仪器显示“100.0µS/cm”，至此校准完毕；每次实验前均需校准DDS‑307雷磁直读电导率仪；3）配子体处理：每组每次选取6枚长势相近的配子体，用直径3mm的钢针在选取的配子体叶片上穿孔，一枚配子体进行两次穿孔；4）膜电导率的测定：取50mL高悬杯，注入30mL的去离子水，将每组进行过穿孔的配子体放入杯中，1分钟后，用DDS‑307雷磁直读电导率仪在1档进行读数，记录此时数值，记为处理电导率值；随后，将盛有配子体的高悬杯，通过恒温电热板加热煮沸，冷却后，用去离子水补充至30mL体积，用DDS‑307雷磁直读电导率仪在1档进行读数，记录此时数值，记为煮沸电导率值；5）实验公式：电解质的相对外渗率（％）=（处理电导率值‑空白电导率值）/（煮沸电导率值‑空白电导率值）膜伤害度（%）=（处理组电解质的相对外渗率‑空白组电解质的相对外渗率）/（1‑空白组电解质的相对外渗率）3、数据分析：电解质的相对外渗率（％）：在不同浓度梯度的三叶鬼针草叶的水提液的处理下，配子体的电解质的相对外渗率（％），基本呈现空白组<12.5%<25%<50%<100%，即随着三叶鬼针草叶的水提液浓度升高电解质的相对外渗率（％）呈上升的趋势，得证随着三叶鬼针草叶的水提液浓度的升高，三叶鬼针草叶的水提液对配子体的化感作用呈加强趋势；膜伤害度（%）：在不同浓度梯度的三叶鬼针草叶的水提液的处理下，配子体的膜伤害度（%），基本呈现空白组<12.5%<25%<50%<100%，即随着三叶鬼针草叶的水提液浓度升高膜伤害度（％）呈上升的趋势，得证随着三叶鬼针草叶的水提液浓度的升高，三叶鬼针草叶的水提液对配子体的化感作用呈加强趋势。