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一种脂肪酸结合型白蛋白‑药物纳米粒子冻干制剂的制备方法，其特征是包括如下步骤：(1)液体A：为水不相溶的有机溶剂，或体积比为10～5:5～1的水不相溶的有机溶剂和无水乙醇的混合液，所述水不相溶的有机溶剂为氯仿、二氯甲烷或乙酸乙酯；溶液B：用液体A配制浓度为0.0033～360mg/ml的静脉注射用脂肪酸溶液，所述静脉注射用脂肪酸为油酸、亚油酸、肉豆蔻酸或甘油三酯；液体C：无菌条件下，用注射用水配制浓度为10～200mg/ml的白蛋白水溶液，按体积比为1:6.67～333的比例将液体A滴入以5,000～15,000rpm转速搅拌的白蛋白溶液中，继续搅拌2～10分钟，使与白蛋白结合的脂肪酸萃取于液体A中，制得液体C；(2)脂肪酸结合型白蛋白‑药物纳米粒子混悬液的制备：用下述几种方式制备：方式一：用溶液B溶解水不溶性药物，获浓度为12.5mg/ml～600mg/ml的液体D，按体积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为3,000rpm～30,000rpm的液体C中，继续搅拌10～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子溶液型混悬液；或者，用溶液B溶解水不溶性药物,获浓度为12.5mg/ml～600mg/ml的液体D，按体积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光，压力为6,000psi～40,000psi下，连续2～8个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子溶液型混悬液；液体C中液体A的体积与溶解水不溶性药物的溶液B的体积之和为油相，液体C中的白蛋白水溶液的体积为水相，油相体积与水相体积之比为0.4％～17.8％；静脉注射用脂肪酸与白蛋白的质量比为0.0001％～5％；水不溶性药物与白蛋白的质量比为：1％～20％；方式二：1)按1～10mg：1ml的比例将水不溶性药物与含0.4～2mg/ml药用级维生素E的大豆油混合；或按1～10mg：1ml的比例将水不溶性药物与含50～100mg/ml维生素C的注射用水混合；在4±1℃、避光，压力为15,000～30,000psi下匀浆处理1～3次；再经4℃下、避光、20,000～35,000rpm离心10～60min，去除上清液，获得水不溶性药物超微纳米粒子；按40mg/ml～600mg/ml比例，将水不溶性药物超微纳米粒子混悬于溶液B中，获得液体D’，为含脂肪酸、水不溶性药物超微纳米粒子和有机溶剂的悬液；2)按体积比为0.3％～4.0％的比例，将液体D’滴入搅拌速度为3,000rpm～30,000rpm的液体C中，继续搅拌15～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；或按体积比为0.3％～4.0％的比例，将液体D’滴入搅拌速度为3,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光、压力为15,000psi～30,000psi下，连续2～6个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；液体C中液体A的体积与液体D’中溶液B体积之和为油相，液体C中的白蛋白水溶液的体积为水相，油相体积与水相体积之比为：0.6％～15.6％；静脉注射用脂肪酸与白蛋白的质量比为0.0001％～1％；水不溶性药物与白蛋白的质量比为：1％～25％；方式三：1)按5～10mg：1ml的比例将水溶性药物与含0.4～2mg/ml药用级维生素E的大豆油混合；在4±1℃、避光，压力为15,000～30,000psi下匀浆处理1～3次；再经4±1℃下、避光、5,000～30,000rpm持续离心10～60min，去除上清液，获得水溶性药物超微纳米粒子；按6.6mg/ml～375mg/ml比例，将水溶性药物超微纳米粒子混悬于溶液B中，获得液体D’，为含脂肪酸、水溶性药物超微纳米粒子和有机溶剂的悬液；2)按体积比为0.8％～7.0％的比例，将液体D’滴入搅拌速度为12,000rpm～32,000rpm的液体C中，继续搅拌5～30分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；或按体积比为0.8％～7.0％的比例，将液体D’滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光、压力为15,000psi～30,000psi下，连续3～8个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；液体C中液体A的体积与液体D’中溶液B的体积之和为油相，液体C中的白蛋白水溶液的体积为水相，油相体积与水相体积之比为：1％～15.8％；静脉注射用脂肪酸与白蛋白的质量比为0.001％～1.4％；水溶性药物与白蛋白的质量比为：1％～20％；方式四：1)调节水溶性药物与液体C中白蛋白结合的条件，将水溶性药物粉末或水溶性药物水溶液加入液体C中，在100～1000rpm下搅拌1～4小时，使水溶性药物与液体C中白蛋白结合制得白蛋白‑水溶性药物结合溶液，即液体C’；2)按体积比为0.8％～7.5％的比例将溶液B，滴入搅拌速度为15,000rpm～25,000rpm的液体C’中，继续搅拌10～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水溶性药物纳米粒子蛋白结合型混悬液；或按体积比为0.8％～7.5％的比例将溶液B，滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C’中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光，压力为10,000psi～25,000psi下，连续1～6个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水溶性药物纳米粒子蛋白结合型混悬液；液体C中液体A的体积与溶液B的体积之和为油相，而白蛋白‑水溶性药物结合溶液的体积为水相，油相体积与水相体积之比为：1％～16％；静脉注射用脂肪酸与白蛋白的质量比为0.002％～15％；水溶性药物与白蛋白的质量比为：1％～25％；方式五：按体积比为1.4％～3.3％的比例，将溶液B滴入搅拌速度为20,000rpm～25,000rpm的液体C中，继续搅拌10～20分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白纳米粒子混悬液；或按体积比为1.4％～3.3％的比例，将溶液B滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟后，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃下，避光，压力为10,000psi～25,000psi下，连续2～6个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白纳米粒子混悬液；将所述脂肪酸结合型白蛋白纳米粒子混悬液放入真空旋转蒸发仪中，在35±2℃、20mmHg减压下，60～80转/分旋转蒸发20～30分钟，去除全部有机溶剂，获半透明乳液；调节水溶性药物与液体C中白蛋白结合的条件，将水溶性药物粉末或水溶性药物水溶液加入半透明乳液中，在250rpm～500rpm下搅拌2～4小时，使水溶性药物与半透明乳液中白蛋白结合制得脂肪酸结合型白蛋白‑水溶性药物纳米粒子空粒结合型乳液；液体C中液体A的体积与溶液B的体积之和为油相，半透明乳液的体积为水相，油相体积与水相体积之比为：2.0％～16.4％；静脉注射用脂肪酸与白蛋白的质量比为0.001％～3.1％；水溶性药物与白蛋白的质量比为：2.5％～15％；方式六：1)用溶液B溶解水不溶性药物，获浓度为10mg/ml～400mg/ml的液体D；2)按5～10mg：1ml的比例将水溶性药物与含0.4～2mg/ml药用级维生素E的大豆油混合；在4±1℃、避光，压力为15,000～30,000psi下匀浆处理1～3次；再经4±1℃下、避光、5,000～30,000rpm持续离心10～60min，去除上清液，获得水溶性药物超微纳米粒子；3)用液体D混悬水溶性药物超微纳米粒子，得到含脂肪酸、水不溶性药物、水溶性药物超微纳米粒子的悬液，按体积比为0.1％～7.2％的比例，将含脂肪酸、水不溶性药物、水溶性药物超微纳米粒子的悬液滴入搅拌速度为3,000rpm～30,000rpm的液体C中，继续搅拌10～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性和水溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；或用液体D混悬水溶性药物超微纳米粒子，得到含脂肪酸、水不溶性药物、水溶性药物超微纳米粒子的悬液，按体积比为0.1％～7.2％的比例，将含脂肪酸、水不溶性药物、水溶性药物超微纳米粒子的悬液滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光，压力为3,000psi～40,000psi下，连续2～8个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性和水溶性药物纳米粒子悬液型混悬液；方式七：1)用溶液B溶解水不溶性药物，获浓度为10mg/ml～400mg/ml的液体D；2)调节水溶性药物与液体C中白蛋白结合的条件，将水溶性药物粉末或水溶性药物水溶液加入液体C中，在100～1000rpm下搅拌1～4小时，使水溶性药物与液体C中白蛋白结合制得白蛋白‑水溶性药物结合溶液，为液体C’；3)按积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为15,000rpm～25,000rpm的液体C’中，继续搅拌10～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性和水溶性药物纳米粒子蛋白结合型混悬液；或按积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C’中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光，压力为6,000psi～40,000psi下，连续2～8个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性和水溶性药物纳米粒子蛋白结合型混悬液；方式八1)用溶液B溶解水不溶性药物，获浓度为10mg/ml～400mg/ml的液体D；2)按积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为3,000rpm～30,000rpm的液体C中，继续搅拌10～60分钟，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子溶液型混悬液；或按积比为0.1％～7.2％的比例，将液体D滴入搅拌速度为10,000rpm～12,000rpm的液体C中，继续搅拌5±1分钟，加入高压微射流机进料容器中，在4±1℃，避光，压力为6,000psi～40,000psi下，连续2～8个循环高压匀浆处理，制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子溶液型混悬液；3)将脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性药物纳米粒子溶液型混悬液放入真空旋转蒸发仪中，在35±2℃、20mmHg减压下，60～80转/分旋转蒸发20～30分钟，去除全部有机溶剂，获半透明乳液；调节水溶性药物与液体C中白蛋白结合的条件，将水溶性药物粉末或水溶性药物水溶液加入半透明乳液中，在250rpm～500rpm下搅拌2～4小时，使水溶性药物与半透明乳液中白蛋白结合制得脂肪酸结合型白蛋白‑水不溶性和水溶性药物纳米粒子空粒结合型混悬液；(3)乳液的制备将步骤(2)中方式一～方式四、方式六和方式七制备的混悬液放入真空旋转蒸发仪中，在35±2℃，负压下，旋转蒸发10～30分钟，去除混悬液中全部有机溶剂，制得半透明的稳定的纳米粒子乳液；(4)冻干制剂的制备将步骤(3)获得的乳液经0.22um膜过滤除菌，或经0.45um和0.22um膜过滤除菌，获无菌乳液，经真空冷冻干燥24～36小时，制得脂肪酸结合型白蛋白‑药物纳米粒子冻干制剂；所述白蛋白为人血清白蛋白或牛血清白蛋白。 |
