一种利用连续酶膜反应制备蚕蛹蛋白ACE抑制肽的方法及其产品及应用

摘要

本发明涉及一种利用连续酶膜反应制备蚕蛹蛋白ACE抑制肽的方法，该方法以碱性蛋白酶为水解用酶，利用酶膜反应器制备蚕蛹蛋白ACE抑制肽；其制备方法为：将蚕蛹蛋白配制成溶液后，与碱性蛋白酶一起在反应罐中进行反应，然后利用超滤膜进行实时分离，截留液返回反应罐中继续反应，透过液经真空浓缩和喷雾干燥后得到粉末状蚕蛹蛋白ACE抑制肽，其IC₅₀为0.10-0.50mg/mL。本发明具有产品收率高、操作方便、生产成本低，适用于连续化生产，所得产品符合功能食品要求。

主权项

一种利用连续酶膜反应制备蚕蛹蛋白ACE抑制肽的方法，其特征在于包括以下步骤：1）将蚕蛹蛋白配制成质量分数为0.5％～3.5％的悬浮液，在功率为100w‑300w超声浴中处理20‑40min得到混合液；2）用碱性溶液调节混合液的pH至8.0～9.5，加热至40℃～55℃后加入到反应罐中，在反应罐中加入2500‑4500U/g的碱性蛋白酶Alcalase，搅拌均匀后进行酶膜反应，酶膜反应的条件为pH 8.0～9.5，温度40℃～55℃；3）将酶膜反应的产物溶液透过超滤膜收集得到透过液、反应不完全的底物和酶溶液，反应不完全的底物和酶溶液被截留后重新流至反应罐中；4）与步骤3）同步进行测定透过液中蚕蛹蛋白ACE抑制肽的浓度，并在反应罐中补充与透过液中蚕蛹蛋白ACE抑制肽相同浓度的蚕蛹蛋白溶液继续进行酶膜反应； 5）重复步骤3）、步骤4）直到蚕蛹蛋白溶液反应完全；6）收集步骤3）和步骤5）中得到的透过液调节pH至中性，然后真空浓缩至蚕蛹蛋白ACE抑制肽质量分数为10％～20%，利用喷雾干燥进行干燥，喷雾干燥的进风温度和出风温度分别控制在180℃～210℃和95℃～115℃，即得到粉末状蚕蛹蛋白ACE抑制肽；所述超滤膜的截留分子量3～10kDa，超滤压力0.5～1.0kg/cm²，出肽速率3～6mL/min。