发明名称 |
一种黄粉虫胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列及克隆方法 |
摘要 |
本发明涉及一种黄粉虫胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列及克隆方法,属于基因工程技术领域;胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列的cDNA序列由869个核苷酸组成,基因编码氨基酸序列为第13-786位核苷酸,终止密码子序列是TAA,位于第787-789位核苷酸,774个核苷酸序列编码258个氨基酸;克隆步骤为黄粉虫总RNA的提取、mRNA的反转录、PCR扩增得到一个基因黄粉虫胰蛋白酶样酶中间保守序列、根据黄粉虫胰蛋白酶样酶中间保守序列设计特异的5’RACE以及3’RACE的下游和上游特异外引物和特异内引物、PCR扩增得到该基因5’端序列以及的3’端序列、将已知的5’端序列和3’端序列拼接得到完整的地鳖虫纤溶酶基因核苷酸序列;采用该方法克隆的质量好,产量高,具有优良的活性物质,应用广泛。 |
申请公布号 |
CN104131016A |
申请公布日期 |
2014.11.05 |
申请号 |
CN201410201202.2 |
申请日期 |
2014.05.14 |
申请人 |
广东工业大学 |
发明人 |
韩雅莉;谭竹钧;叶韵;于晓谦 |
分类号 |
C12N15/57(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/57(2006.01)I |
代理机构 |
广州市南锋专利事务所有限公司 44228 |
代理人 |
刘媖 |
主权项 |
一种黄粉虫胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列,其特征在于:其cDNA序列由869个核苷酸组成,自5’至3’端序列为:ACACTTCTCACAATGAAATCAATCTTGTTTGTAGTCTTCTTGGTAGCTTCCGCCTCAGCGGTCCCACCTTTCCTCCGCAAGAACAGCTTGCTGCCTGATGGCAGAATCGTAGGAGGCTCCAGCATTTCCATCTCTTCGGTCCCATGGCAAATCTCTCTCCAATACTACGGTTCCCACATCTGCGGTGGTTCAATAATCAGCGCTAACTACATTGTTACTGCTGCCCATTGTACCGATGGATTGACTGCTGGTTCTTTGACCGTCCGTGCTGGAACTTCCACTCGTGGTTCCGGTGGTCAGGTGGTCAACGTCGCTAGGATTAACCAAAATCCCAGCTACAATGACAGGCTCATCGATTATGACATCTCGGTTTTGCAACTGTCTTCGTCTTTGTCTCTGGGCAGCAGCGTAGCCGCTGTAGGCCTTCCATCGTCGAGCACCAGCTGGTCCGCTGGTACTTCCGTTCTCGTAACTGGCTGGGGAACCACCACCGAGGGTTCAAGCTCGCTTCCCTCCGCCTTGCAAGGAGTCAACGTTCAAATTGTTAGCCAATCGACCTGCTCATCCGCATACGGTTCTGGTAGCATCACCGACCGCATGTTGTGCGCTGGTGTTACCGGAGGCGGAAAAGATGCTTGCCAAGGAGACTCCGGCGGTCCACTTGTTGTCGGCAACGTTCTTGCCGGTATCGTCTCTTGGGGATATGGATGTGCCCGCAATGGTTATCCTGGAGTTTATTCTAACGTACCTGCTCTCCGCAGCTACATCCAACAAACCGCCGGAATATAAACTCTTTAAATACTTGTTGCCGCTAATTACGTAAACGACACGGATATGACAATAAATATTTAGTTTTCAAAAAAAAAAAA。 |
地址 |
510006 广东省广州市番禺区外环西路100号 |