用于改善蛋白质特性的方法

摘要

本发明提供了用于改造蛋白质以优化某些目的环境条件下蛋白质性能的方法。在一些实施方案中，本发明提供了用于改造酶以优化特定环境条件下酶催化活性的方法。在一些优选的实施方案中，本发明提供了用于改造酶以优化不利环境条件下其催化活性和/或稳定性的方法。在一些优选的实施方案中，本发明提供了用于改造酶以优化它们的贮存稳定性，尤其不利环境条件下的贮存稳定性的方法。在一些优选的实施方案中，本发明提供了用于改变酶(例如金属蛋白酶)的表面净电荷和/或表面电荷分布以获得与初始酶或亲代酶相比在洗涤剂制剂中显示改良性能和/或稳定性的酶变体的方法。

主权项

用于产生改良的蛋白质变体的方法，所述方法以可操作的顺序包括：a)在第一特性的第一试验和在第二特性的第二试验中测试多种单一替换的蛋白质变体，其中亲代蛋白质的特性在每个试验中给予值1.0，适宜的第一或第二特性具有变体蛋白质性能对亲代蛋白性能之比大于1.0，并且非常不适宜的第一或第二特性具有小于约0.80的比值；b)在单一替换的蛋白质变体的至少之一中鉴定与适宜第一特性相关并且与非常不适宜的第二特性不相关的替换；c)在单一替换的蛋白质变体的至少之一中鉴定与适宜第二特性相关并且与非常不适宜的第一特性不相关的替换；d)导入来自步骤b的替换和来自步骤c的替换至蛋白质以产生多重替换的蛋白质变体；和e)在第一试验和第二试验中测试多重替换的蛋白质变体，其中改良的蛋白质变体在所述第一和第二试验中均实现大于1.0的比值，或在第一试验中实现大于1.0的比值并且在第二试验中实现0.80至1.0的比值，其中所述的多重替换的蛋白质变体是改良的蛋白质变体，且其中(i)所述亲代蛋白质是蛋白酶，所述第一特性是稳定性，且所述第二特性是洗涤性能；或(ii)所述亲代蛋白质是淀粉酶，所述第一特性是蛋白质表达，且所述第二特性是酶活性，且其中所述替换的至少之一包含相对于亲代酶的0、‑1或‑2的净电荷改变；和/或所述替换的至少之一包含相对于亲代酶的+1或+2的净电荷改变；其中所述改良的酶变体相对于亲代酶具有+1或+2的净电荷改变。