一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法

摘要

本发明公开了一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法，属于分子生物技术领域，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析，测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，本方法可以实现对短链RNA尤其是miRNA的绝对定量，且具有高特异性、高灵敏度、结果客观、重复性好，可在100-10⁶拷贝数范围内准确定量，也适用于RNA粗提物。

主权项

一种利用扩增DNA片段长度多态性定量测定短链RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些作为内标的所述合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析,测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，从而实现所述待测短链RNA的相对定量。