水仙退化病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种水仙退化病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于水仙退化病毒的检测。该试剂盒包括：外侧正向引物、外侧反向引物、内侧正向引物、内侧反向引物、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、PCR Buffer、Mgcl₂、Taq DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照和RNase-free ddH₂O。本发明利用巢式RT-PCR技术对水仙退化病毒进行检测，具有特异性强、灵敏度高、操作简便和检测时间快的优点，适用于我国进出境口岸检疫和农业生产上对水仙退化病毒的快速检测、疫情监控及预警预报，应用前景十分广泛。

主权项

一种水仙退化病毒巢式RT‑PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：1)外侧正向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑ACCGTTGGCATCACTAAG‑3’；2)外侧反向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑ACTGGTTCCACGCTCCTA‑3’；3)内侧正向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑GCGGTGATAACAATTCGAGA‑3’；4)内侧反向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑GCTAAGTCCTTCAATTTCCGTC‑3’；5)RT Buffer：5×；6)RNA酶抑制因子：40U/μL；7)反转录酶：200U/μL；8)dNTPs：10mmol/L；9)PCR Buffer：10×；10)Mgcl2：25mmol/L；11)Taq DNA聚合酶：5U/μL；12)水仙退化病毒的阳性对照样品；13)不含水仙退化病毒的阴性对照样品；14)RNase‑free ddH₂O。