抗牙周病致病菌复合IgY的制备方法

摘要

本发明涉及一种抗牙周病致病菌复合IgY的制备方法，包括：抗原制备；注射；获取免疫蛋；抗体的提取纯化：将蛋壳消毒，打蛋分离出蛋黄；然后稀释蛋黄并过滤，得滤液；絮凝澄清；超滤浓缩：将过滤后的滤液进行超滤浓缩，得超滤浓缩液；调节所述超滤浓缩液至中性，测蛋白总量，加入蛋白保护剂；冷冻干燥：加入蛋白保护剂的物质进行冷冻干燥，即得。本发明中提取纯化工艺运用非剪切工艺，根据IgY蛋白特性采用了絮凝剂、蛋白保护剂、蛋白稳定剂组合技术，使得在一系列处理中，蛋白几无变性，保持蛋白活性，提高了IgY对于相应抗原的效价；制备方法简捷精炼，能耗低安全性好，综合成本低，适合于工业化批量生产。

主权项

一种抗牙周病致病菌复合IgY的制备方法，包括：（1）抗原制备：用伴放线放线菌、牙龈卟啉单胞菌、变形链球菌作为抗原菌的制备，超声破壁处理达到疫苗制剂浓度，制备弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂；（2）注射：用上述疫苗对产蛋家禽进行注射；（3）获取免疫蛋：检取所述家禽所生的免疫蛋；（4）抗体的提取纯化：将蛋壳消毒，打蛋分离出蛋黄；然后稀释蛋黄并过滤，得滤液；（5）絮凝澄清：在上述滤液中加入浓度为2‑5%的蛋白稳定剂；再加入一种絮凝剂；沉降20‑30h，虹吸上清液纱布过滤；其中每加一次絮凝剂，都要呈细流在搅拌下缓缓加入；（6）超滤浓缩：将步骤（5）过滤后的滤液进行超滤浓缩，得超滤浓缩液；调节所述超滤浓缩液至中性，测蛋白总量，超滤浓缩液保存：加入蛋白稳定剂，在‑（20‑30）℃保存；（7）冷冻干燥：将步骤（6）浓缩液加入蛋白保护剂，冷冻干燥或喷雾干燥即得IgY粉状制品。