发明名称 一种腺萼马银花组织培养快速繁殖方法
摘要 本发明涉及一种腺萼马银花组织培养快速繁殖方法,该方法按如下步骤进行:1)外植体的选择;2)外植体灭菌;3)腋芽诱导培养;4)增殖培养;5)壮苗培养;6)瓶外生根。本发明以当年开花嫩茎段为外植体,以WPM或Anderson为基本培养基,利用ZT激素,诱导效果好、增殖系数高、培育壮苗优、生根成活快,成功建立了有效的腺萼马银花组培快繁体系。本发明一个增殖继代周期内(6-8周)增殖系数控制在5-6倍,一年内增殖系数为1万倍左右,极大提高了腺萼马银花的繁殖系数,为该物种的保存和可持续发展提供了可靠有效的繁殖方法,为野生杜鹃的园林绿化应用提供了科学的技术支撑。 
申请公布号 CN103355173B 申请公布日期 2014.10.29
申请号 CN201310323906.2 申请日期 2013.07.30
申请人 杭州植物园 发明人 朱春艳;余金良;朱丹华;吕敏;朱剑俊
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 代理人 王从友
主权项 一种腺萼马银花组织培养快速繁殖方法,其特征在于该方法按如下步骤进行:1)外植体的选择:春季从已开花腺萼马银花母株上剪取带有潜伏芽的新发枝条;2)外植体灭菌:剪去枝条叶片,先用自来水浸泡并冲洗10‑20分钟,用洗洁精洗涤1‑2次后吸干;然后,在无菌室超净台上用75%酒精消毒15‑30秒,用无菌水冲洗3‑5遍,再用0.1%氯化汞消毒8‑12分钟,最后用无菌水冲洗3‑5遍后吸干;3)腋芽诱导培养:将灭好菌的枝条切除茎尖,余下的枝条剪成2‑3cm长的茎段,每段带有1‑2个腋芽,斜插入诱导培养基中;于23‑26℃光16小时,黑8小时,培养3‑5周后,茎段潜伏芽发育生长出新枝条至2‑4cm长;所述的诱导培养基由以下的组分构成:WPM或Anderson基本培养基 + ZT 1.0‑2.0 mg/L + NAA0.05‑0.1 mg/L + 20 g/L 蔗糖或白糖 + 6‑10 g/L 琼脂,pH4.8‑5.2,高温灭菌;4)增殖培养:剪取新长出的枝条,去顶芽后插入增殖培养基中,于23‑26℃光16小时,黑8小时,培养6‑8周后,茎段长出丛生芽;此阶段重复进行;所述的增殖培养基由以下的组分构成: WPM或Anderson基本培养基 + ZT 1.0‑2.0 mg/L + NAA 0.05‑0.1mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6‑10 g/L 琼脂,pH 4.8‑5.2,高温灭菌;5)壮苗培养:将长到1‑2cm长的丛生芽剪切移入壮苗培养基中,于23‑26℃光16小时,黑8小时,培养2‑4周,待长到3‑5cm后移入基质中,进行瓶外生根;所述的壮苗培养基由以下的组分构成:WPM或Anderson基本培养基+ ZT 0.5‑1.0 mg/L + NAA0.05‑0.1 mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6‑10 g/L 琼脂,pH 4.8‑5.2,高温灭菌;6)瓶外生根:在每年10至次年3月,将长到3‑5 cm高的瓶苗在室外放置1周,洗去枝条上的琼脂后移入含有含泥炭:珍珠岩:蛭石体积比2:1:1的基质中,在保湿保温条件下生长,1‑2个月后生根。
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