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一种实时荧光PCR扩增仪,它由加热致冷模块、样品管载盘组件、检测模块、铂热电阻和控制器组成,其特征是加热致冷模块由电加热圈、致冷器、散热器和电风扇组成,电加热圈与致冷器之间有一加热致冷室,电加热圈和致冷器功率可变,用于对其周围空气加热致冷,致冷器装有半导体致冷片,改变半导体致冷片供电电流实现改变致冷功率,电加热圈与致冷器的冷热气流通过加热致冷室、电加热圈的中间孔经电风扇搅匀后向下推送给样品管载盘中的样品,该结构隔离了向上的不均匀热气流使样品温度更均匀,样品管载盘组件由样品管载盘、步进电机和传动轴组成,样品管载盘均等分布用于放置样品管的孔,并安装激光对射定位装置,以识别样品管的1号孔,即当样品管的1号孔进入测量位置时,激光二极管发射的光信号刚好通过定位孔被光线接收头所接收,从而起动检测,并由步进电机带动样品管载盘旋转,依序定位检测各样品管中的样品,采用激光对射定位装置其定位精度高,激光对射定位装置由发射装置中的激光二极管和定位接收装置中的光线接收头构成,激光二极管额定功率取不大于0.4mW,采用占空比小的激光二极管脉冲电源,传动轴两端分别与步进电机的轴和样品管载盘固定,用于传递步进电机转角,在靠近样品管载盘的样品管的外侧均匀分布3只铂热电阻的传感器,铂热电阻的补偿电阻采用精密线绕电阻,同时在控制器中装有3至4只精密线绕电阻,其电阻值按照DNA变性、复性和延伸三个环节所设定温度附近的温度点查铂热电阻分度表获得,将精密线绕电阻对应的温度值记录保存在控制器的非易失存储器中,用于校正仪表温度,所述校正是在每次开机后进行误差校验一次,它通过单多通道模拟电子开关分时选通精密线绕电阻接入输入信号放大电路Ⅱ实现校验,校正时由定时送检获得各铂热电阻温度测量误差,以及精密线绕电阻所显示温度与所述保存在非易失存储器中的应当显示温度之差,由控制器对铂热电阻所测温度进行补偿,检测模块由激发光源和检测接收装置组成,激发光源由LED发光二极管、反光杯、滤光镜Ⅰ和激发隔离筒构成,需要不同的LED发光二极管再配滤光镜才能更好地实现不同激发波长,采用反光杯使光线更加集中,检测接收装置由接收隔离筒、滤光镜Ⅱ和光电倍增管组成,激发光源和检测接收装置置于加热室外,以减少热源波动对发射和接收灵敏度的影响,并均通过光的隔离筒在加热室内向样品发射和接收光信号,隔离筒与滤光镜都是用于排除环境光和无用光信号的影响,用以提高光检测精度,温度控制是在控制器控制下,根据PCR反应环节所设定的温度先以大功率升温或降温,当达到设定的温度后,再以小功率的加热或致冷,使温度控制的回差保持在PCR扩增允许的温度控制精度范围内。 |
