一种人工湿地的基质上厌氧氨氧化细菌的培养方法

摘要

本发明公开一种人工湿地的基质上厌氧氨氧化细菌的培养方法，即首先收集新鲜牛粪于具盖的塑料容器1内，将50-100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉用无菌水在常温下溶解后倒入具盖的塑料容器1的新鲜牛粪中，搅拌3-5遍后盖紧具盖的塑料容器1的盖子，然后于温度20-40℃环境中发酵20-40天，得到的发酵液先用10-30目筛子过滤，然后再用60-100目筛子过滤，得到滤液倒入装有湿地用的基质即石子或沙子的具盖的塑料容器2中直到完全淹没石子或沙子为止，然后盖紧具盖的塑料容器2的盖子，在20-30℃下保持7-21天，捞出石子或沙子，即完成了人工湿地的基质上厌氧氨氧化细菌的培养。

主权项

一种人工湿地的基质上厌氧氨氧化细菌的培养方法，其特征在于具体包括如下步骤：（1）、准备介质收集新鲜牛粪，将其存放于具盖的塑料容器1内，搅拌3‑5遍，备用；（2）、将50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉，放置于‑20‑‑5℃低温环境中保存； （3）、准备无菌水将蒸馏水在常温下煮沸5‑15分钟，冷却后充氮气3‑10分钟，得到无菌水，密闭保存；（4）、菌种处理将步骤（2）准备好的50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉用步骤（3）所得的无菌水在常温下溶解；溶解所用的无菌水的量，按50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉：无菌水为1g:10‑50ml的比例计算；（5）、接种和发酵将步骤（4）溶解的50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉倒入步骤（1）的具盖的塑料容器1中，搅拌3‑5遍后盖紧具盖的塑料容器1的盖子，然后于温度20‑40℃环境中发酵20‑40天，得到发酵液；上述所用的50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉的量，按50‑100cfu的厌氧氨氧化菌菌株冻干粉：新鲜牛粪为1g:10‑50kg的比例计算；（6）、过筛将步骤（5）所得的发酵液先用10‑30目筛子过滤，然后再用60‑100目筛子过滤，得到滤液；（7）、接种将湿地用的基质即石子或沙子放入具盖的塑料容器2中，将步骤（6）所得的滤液倒入具盖的塑料容器2，直到滤液完全淹没石子或沙子为止，然后盖紧具盖的塑料容器2的盖子，在20‑30℃环境条件下保持7‑21天，捞出石子或沙子，即完成了人工湿地的基质上厌氧氨氧化细菌的培养。