一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法

摘要

本发明涉及一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括：对rhG-CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，制得包涵体；将包涵体进行变性处理，然后用柱层析进行复性，得rhG-CSF复性液；最后进行阳离子层析和凝胶过滤层析，收集得到重组人粒细胞集落刺激因子。采用柱层析复性的方法，简化了操作方式，使重组人粒细胞集落刺激因子的复性收率高于70%；复性液经过阳离子交换和分子筛层析后制备成rhG-CSF的原液。原液电泳纯度达到99%以上，RP-HPLC的纯度达到98%以上，比活性6.6×10⁷IU/mg。

主权项

一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括:（1）对rhG‑CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，经超声破碎和离心处理，制得包涵体；（2）将上述包涵体经洗涤和溶解后，进行变性处理，得到变性蛋白溶液；（3）将所得变性蛋白溶液进行稀释，然后用柱层析进行复性处理，得rhG‑CSF复性液；（4）将复性液进行阳离子层析和凝胶过滤层析，收集得到重组人粒细胞集落刺激因子。