提取分离海州香薷中迷迭香酸、芹菜素和木犀草素的方法

摘要

本发明公开了一种提取分离海州香薷中迷迭香酸、芹菜素和木犀草素的方法，依次包括以下步骤：（1）、乙醇浸提：将盛花期收获的海州香薷花枝和叶片风干后粉碎，经浸提和萃取，得棕黑色浸膏；（2）、将棕黑色浸膏进行大孔树脂粗分离，浓缩后，得到黄棕色浸膏；（3）、将所得的黄棕色浸膏进行聚酰胺柱分离，分别得到浸膏A、浸膏B、浸膏C；（4）、浸膏A、浸膏B和浸膏C分别进行硅胶柱层析纯化精制，从而对应的得到芹菜素、芹菜素和迷迭香酸。采用本发明的方法能获取高纯度的迷迭香酸、芹菜素和木犀草素。

主权项

提取分离海州香薷中迷迭香酸、芹菜素和木犀草素的方法，其特征在于依次包括以下步骤：(1)、乙醇浸提：将盛花期收获的海州香薷花枝和叶片风干后粉碎，用体积浓度≥95％的乙醇溶液浸提，所得的提取液经真空浓缩后得粗浸膏；将粗浸膏用水溶解，得溶解液；在溶解液中加入石油醚萃取，所述石油醚与溶解液的体积比为1:0.9～1.1，弃石油醚层；在所得的水层中加入乙酸乙酯反复萃取，直至乙酸乙酯萃取层无颜色；所述每次萃取时乙酸乙酯的用量是溶解液体积的0.9～1.1倍；将所有的乙酸乙酯萃取层合并后浓缩，得棕黑色浸膏；(2)、大孔树脂粗分离：将所得的棕黑色浸膏制成水溶液，上样于D101大孔树脂并充分吸附，依次用水以及体积浓度为10％、20％、30％、40％的乙醇溶液以1.4～1.6BV/h梯度进行洗脱分离；收集体积浓度为30％和40％乙醇溶液对应的洗脱液，浓缩得到黄棕色浸膏；所述棕黑色浸膏与D101大孔树脂的用量比为：1g棕黑色浸膏/10～15mlD101大孔树脂；所述每100ml水溶液中含有15～25g的棕黑色浸膏；所述水、体积浓度分别为10％、20％、30％、40％的乙醇溶液的用量分别为：0.8～1.2BV、1.8～2.2BV、4.8～5.2BV、5.8～6.2BV、3.8～4.2BV；(3)、聚酰胺柱分离：将所得的黄棕色浸膏用甲醇溶解，得溶液，所述黄棕色浸膏与甲醇的用量比为1g/2～5ml；按黄棕色浸膏与聚酰胺粉为1:1～2的质量比，在所述溶液中加入聚酰胺粉，得到的悬浊液在20～30℃下减压浓缩至干，得粉状上样物；按黄棕色浸膏与聚酰胺的质量比1:30～50的比例，取依次经乙醇和水处理后的聚酰胺溶液倒入层析柱中，并用二氯甲烷置换聚酰胺溶液中的水；将粉状上样物均匀上样于聚酰胺柱顶端，以CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝(60:1:3)，(50:1:2.5)，(40:1:2)，(30:1:1.5)，(20:1:1)的体积比浓度梯度进行加压梯度洗脱，用TLC分析，以CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝20:2:1为展开剂，通过质量浓度3％的FeCl₃乙醇溶液显色指示，根据显色斑点分布情况，收集成份相似的洗脱液；分别减压浓缩，25～50℃逐渐升温旋蒸至干，从而分别得到浸膏A、浸膏B、浸膏C；其中，浸膏A对应浓度梯度为CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝60:1:3；浸膏B对应浓度梯度为CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝50:1:2.5以及CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝40:1:2；浸膏C对应浓度梯度为CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝30:1:1.5CH₂Cl₂:CH₃OH:HCOOH＝20:1:1；(4)、硅胶柱层析纯化精制：①、将硅胶用乙酸乙酯或石油醚溶解后加压装柱，硅胶与乙酸乙酯或石油醚的质量体积比为1g/4～8ml；配套浸膏A的硅胶用乙酸乙酯溶解，配套浸膏B和配套浸膏C的硅胶均用石油醚溶解；②、将上述所得的浸膏A、浸膏B和浸膏C，分别进行以下操作：用甲醇溶解后加入硅胶进行拌样，硅胶与浸膏A、浸膏B和浸膏C的重量比均为2:1～4:1；旋干后将所得的3种拌样分别装在柱顶端，上样后分别进行硅胶柱层析纯化精制；从而分别对应的得到芹菜素、木犀草素和迷迭香酸；所述步骤①所用的硅胶的总重量与步骤②拌样用硅胶的重量比为20～30:1。