知母药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法

摘要

本发明涉及知母药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱，所述建立方法包含色谱条件、供试品溶液的制备、对照品溶液的制备，其中色谱条件为：Thermo C₈色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈-0.2%醋酸水溶液梯度洗脱；柱温:20℃；流速:1mL·min^-1；ELSD检测器雾化器流速：2.6L·min^-1；漂移管温度：100℃；进样量：20ul。本发明的优点是方法稳定、重现性好、精密度高，能同时反映知母药材中主要的化学成分皂苷类和双苯吡酮类成分的特征，并能从色谱的整体特征上把握知母药材的质量，可将其作为知母药材质量控制的方法之一。

主权项

知母药材HPLC‑ELSD指纹图谱的建立方法，包含色谱条件、供试品溶液的制备、对照品溶液的制备，其特征在于，该方法包括以下步骤： 供试品溶液的制备：取过四号筛的知母药材粉末约1.0克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入浓度为50％的乙醇25ml，称定重量；以功率为400W，频率为40kHz超声30min；放冷，再称定重量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀；滤过，取续滤液，0.45um针头微孔过滤器过滤，作为供试品溶液； 对照品溶液的制备：分别称取知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ、芒果苷、新芒果苷、知母皂苷C适量，加50％乙醇配制成每ml溶液中分别含有知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ、芒果苷、新芒果苷、知母皂苷C为0.267mg、0.115mg、0.098mg、0.195mg、0.142mg的混合对照品溶液，摇匀，备用； 色谱条件为：Thermo C₈色谱柱4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙腈‑0.2％醋酸水溶液梯度洗脱；柱温:20℃；流速:1mL·min^‑1；ELSD检测器雾化器流速：2.6L·min^‑1；漂移管温度：100℃；进样量：20μL；流动相按照梯度洗脱梯度变化为： 时间：分钟 乙腈：％ 醋酸水：％ 0 5 95 5 7 93 5.01 15 85 15 15 85 15.01 22 78 36 22 78 36.01 35 65 43 35 65 43.01 40 60 51 50 50 51.01 100 0 601000  测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，测定所有供试品。