发明名称 |
一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用 |
摘要 |
本发明涉及生物载体领域,特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法,包括以下步骤:构建aroA基因敲除打靶片段;将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株,获得BL21(DE3)/pKD46菌株;将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株,获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法,采用大于500bp的同源侧翼序列,利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因;该菌株既可用于EPSPS功能互补验证,还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达,达到一举两得的效果。 |
申请公布号 |
CN104099363A |
申请公布日期 |
2014.10.15 |
申请号 |
CN201410346343.3 |
申请日期 |
2014.07.18 |
申请人 |
江苏省农业科学院 |
发明人 |
巩元勇;倪万潮;郭书巧;束红梅;沙琴 |
分类号 |
C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 |
代理人 |
吴开磊 |
主权项 |
一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:构建aroA基因敲除打靶片段;将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株,获得BL21(DE3)/pKD46菌株;将aroA基因敲除打靶片段转化进入BL21(DE3)/pKD46菌株,获得所述BL21(DE3)ΔaroA菌株。 |
地址 |
210000 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园区江苏省农业科学院基地 |