发明名称 |
一种重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体的纯化方法 |
摘要 |
本发明涉及生物制药技术领域,尤其涉及一种重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体纯化方法。该方法将待纯化重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品上样于平衡后的阳离子交换层析柱,经洗涤、淋洗、再平衡后,洗脱,得到纯化后的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体溶液;待纯化的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品的制备方法为:取整合了人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体基因的仓鼠卵巢细胞,经培养后,取细胞培养上清液,采用Protein A亲和层析,即得;淋洗为线性梯度洗脱;再平衡的缓冲液为柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液或磷酸缓冲液。本发明通过淋洗步骤,成功提高了重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体的纯度。 |
申请公布号 |
CN104098697A |
申请公布日期 |
2014.10.15 |
申请号 |
CN201310129636.1 |
申请日期 |
2013.04.15 |
申请人 |
上海众合医药科技有限公司;无锡药明康德生物技术有限公司 |
发明人 |
沈克强;陈智胜;鲁钱达;朱建;王威 |
分类号 |
C07K16/24(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;C12P21/08(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N |
主分类号 |
C07K16/24(2006.01)I |
代理机构 |
北京集佳知识产权代理有限公司 11227 |
代理人 |
赵青朵;冯琼 |
主权项 |
一种重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体的纯化方法,其特征在于,将待纯化的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品上样于平衡后的阳离子交换层析柱,经洗涤、淋洗、再平衡后,洗脱,得到纯化后的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体溶液;所述待纯化的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品的制备方法为:整合了人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体基因的中国仓鼠卵巢细胞,经诱导培养后,取细胞培养上清液,采用Protein A亲和层析,即得;所述淋洗为线性梯度洗脱,所述淋洗采用的淋洗液为A液与B液的混合液,其中A液的体积分数逐渐降低;所述再平衡的缓冲液为柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液或磷酸缓冲液;所述A液为含有NaCl的缓冲液;所述缓冲液选自柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液或磷酸缓冲液,其中,所述A液中NaCl的摩尔体积浓度为50mmol/L~100mmol/L;所述B液为含有NaCl的第二缓冲液;所述第二缓冲液选自柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液或磷酸缓冲液,其中,所述B液中NaCl的摩尔体积浓度为80mmol/L~140mmol/L。 |
地址 |
201203 上海市浦东新区张江高科技园区蔡伦路781号602室 |