一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法

摘要

一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程；运用塔板理论对线性多阶梯度洗脱条件近似处理，获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数和对应的保留因子k_i；通过起始体积分数和对应的保留因子k_i获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间。本方法高精度的预测出任意梯度条件下的保留时间，且预测过程简单；通过三个实施例验证了本方法的可行性，且当保留时间考虑仪器的滞留时间时，进一步提高了保留时间的精度。

主权项

一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程；(2)运用塔板理论对线性多阶梯度洗脱条件近似处理，获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数和对应的保留因子k_i；(3)通过起始体积分数和对应的保留因子k_i获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间；其中，所述获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程具体包括：其中a、b、c、d为拟合参数；k为容量因子；为弱极性溶剂B在流动相的体积分数；测量弱极性溶剂B在流动相的不同体积分数下的保留时间，再根据t_R＝t₀(1+k)计算该体积分数下的容量因子k，t_R为保留时间、t₀为死时间；根据不同的体积分数及对应容量因子k拟合保留方程，得到相应的拟合参数a、b、c、d；其中，所述获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数和对应的保留因子k_i具体包括：1)在多阶梯度洗脱条件下，计算多阶梯度洗脱总时间t；$t=\Sigma t_{\mathrm{hi}}+t_i$其中t_hi为第i阶段梯度洗脱的终止体积分数保持时间，t_i为第i阶段梯度洗脱的需要时间，为第i阶段梯度洗脱的终止体积分数，为第i阶段梯度洗脱的起始体积分数，r_i为第i阶段梯度洗脱的速率；2)确定待测化合物第i次跳跃时，对应的起始体积分数；3)通过计算出待测化合物第i次跳跃时，对应的保留因子k_i；其中，所述通过起始体积分数和对应的保留因子k_i获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间具体为：1)利用第i次跳跃对应的保留因子k_i，分别计算待测化合物在第1、2、3…n…N块塔板中固定相浓度C_gni和流动相浓度C_lni；2)通过计算得到待测化合物第i‑1次、第i次和第i+1次跳跃时，第N块塔板上流动相的浓度分别为C_lN(i‑1)、C_lNi和C_lN(i+1)；当C_lNi＞C_lN(i‑1)，且同时C_lNi＞C_lN(i+1)时，停止计算，从而确定跳跃次数i值，计算待测化合物保留时间。