摘要 |
Способ выявления устойчивых к пиразинамиду изолятов Mycobacterium tuberculosis, путем определения мутаций в гене pncA, ассоциированных с формированием устойчивости к пиразинамиду, посредством проведения ПЦР в режиме «реального времени» с использованием HRM-анализа, отличающийся тем, что проводят амплификацию на смеси равного количества тестируемой ДНК и ДНК дикого типа с использованием праймеров:Pnc18U: 5'-TACGCTCCGGTGTAGGCAC-3'Pnc15R: 5'-GAAGCGGCGGACTACCATC-3',формируют гетеродуплексы за счет одновременной коамплификации ДНК дикого типа и тестируемой ДНК, при этом на первом этапе ПЦР проводят уравнивание концентрации с помощью количественной ПЦР с использованием той же пары праймеров (Pnc18U/Pnc15R) с построением калибровочной кривой и использованием регрессионного уравнения. |