3-芳基-5-甲基丁内酯化合物用作抗植物病毒剂的方法

摘要

本发明3-芳基-5-甲基丁内酯化合物用作抗植物病毒剂的方法，涉及化学化合物的抗植物病毒剂，包括用于抗烟草花叶病毒活性的方法、用于离体杀真菌活性的方法和活体杀真菌活性的方法；3-芳基-5-甲基丁内酯化合物中的I_a-1～I_a-9和I_ｂ-1～I_ｂ-9在500μg/mL的浓度对烟草花叶病毒的抑制率高达60%以上，对14种真菌表现出较高的杀菌活性。相对于现有技术，本发明方法具有显著的进步和极为突出的经济效益。

主权项

3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物用作抗植物病毒剂的方法，其特征在于步骤如下：A.所述的3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物为具有如下所示通式(I)所示结构的化合物：通式(I)所示结构的化合物又包括I_a和I_b两类，具体个体化合物如下：B.上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物用作抗植物病毒剂的方法如下：B‑1.用于抗烟草花叶病毒活性的步骤如下：第一步，烟草花叶病毒提纯及浓度测定：烟草花叶病毒提纯及浓度测定参照南开大学元素所生测室编制烟草花叶病毒SOP规范执行，病毒粗提液经2次聚乙二醇离心处理后，测定浓度，4℃冷藏备用；第二步，上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物药剂溶液的配制：称量上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物40mg作为原药，然后在该原药中加入DMF0.4mL进行溶解，制得1×10⁵μg/mL母液，再用质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液稀释至测试浓度为500μg/mL或100μg/mL，由此配制得上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物药剂溶液；第三步，离体作用：摩擦接种3–5叶期珊西烟叶片，用流水冲洗，病毒浓度为10μg/mL，收干后剪下，沿叶中脉对剖，左右半叶分别浸于质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液及第二步配制得的上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物药剂溶液中，30min后取出，于常温光照条件下保湿培养，每3片叶为1次重复，重复3次，3天后记录病斑数，计算防效；第四步，活体保护作用：选长势均匀一致的3–5叶期珊西烟，全株喷雾施第二步配制得的上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物药剂溶液，每处理3次重复，并设置质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液对照，24h后，叶面撒布500目金刚砂，用毛笔蘸取病毒液，在全叶面沿支脉方向轻擦2次，叶片下方用手掌支撑，病毒浓度10μg/mL，接种后用流水冲洗，3天后记录病斑数，计算防效；第五步，活体治疗作用：选长势均匀一致的3–5叶期珊西烟，用毛笔全叶接种病毒，病毒浓度为10μg/mL，接种后用流水冲洗，叶面收干后，全株喷雾施第二步配制的上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物药剂溶液，每处理3次重复，并设置质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液对照，3天后记录病斑数，计算防效；第六步，活体钝化作用：选长势均匀一致的3–5叶期珊西烟，将第二步配制的上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物药剂溶液与等体积的病毒汁液混合钝化30min后，摩擦接种，病毒浓度为20μg/mL，接种后即用流水冲洗，重复3次，设置质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液对照，3天后数病斑数，计算结果；B‑2.用于离体杀真菌活性的步骤如下：菌体生长速率测定法即平皿法：将3mg上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物的个体化合物溶解在0.03mL丙酮内，然后用含有200μg/mL吐温80的水溶液稀释至测试浓度为50mg/kg，然后各吸取1mL药液注入与之对应的培养皿内，再分别加入9mL培养基，摇匀后制成50μg/mL的含药平板，以添加1mL灭菌纯净水的平板做空白对照，用直径4mm的打孔器沿菌丝外缘切取菌盘，移至含药平板上，每处理重复三次，将培养皿放在24±1℃恒温培养箱内培养，48h后调查各处理菌盘扩展直径，求平均值，与空白对照比较计算相对抑菌率，B‑3.活体杀真菌活性的步骤如下：植株喷雾法：称量30mg上述3‑芳基‑5‑甲基丁内酯化合物中的一个个体化合物，溶于0.3mL二甲基亚砜中，然后加入质量百分比浓度为1‰的吐温80水溶液，配制成测试浓度为200μg/mL的喷雾用药剂，供试黄瓜、小麦幼苗、玉米幼苗培养于日光温室，黄瓜第一片真叶完全展开后，用上述喷雾用药剂喷雾处理，喷液量1mL/处理，喷雾压力为0.7kg/cm²，喷雾距离为15cm，小麦一叶一心期处理，方法与黄瓜处理过程相同，玉米幼苗处理方法与黄瓜处理过程相同，药剂处理后24h，黄瓜灰霉与黄瓜霜霉均采用喷雾接种5×10⁵个/mL的孢子囊悬浮液于药剂处理后的黄瓜真叶叶背，至叶片呈水浸状止，暗环境保湿培养24h，后移至温室环境下正常培养，48h后调查结果，小麦苗则采用沉降接种法，接菌后7天调查结果，结果调查采用分级方法，以“100”级代表无病，即抑制率100％；“0”级代表最严重的发病程度，抑制率为0，记录结果。