主权项 |
一种制备依诺肝素钠的工艺,其特征在于:该制备方法包括以下步骤:S1:肝素‑苄索氯铵盐的制备:将肝素钠和苄索氯铵分别溶解于纯化水中,得肝素钠溶解液和苄索氯铵溶解液,室温搅拌下将肝素钠溶解液缓慢加入到苄索氯铵溶解液中,加入完毕后继续室温下搅拌,收集沉淀物,即为肝素‑苄索氯铵盐,并将其在50℃~60℃真空干燥,得到含水量低于5%的肝素‑苄索氯铵盐;S2:肝素苄基酯的制备:将步骤S1中得到的肝素‑苄索氯铵盐溶解于二氯甲烷中,在25~45℃下搅拌至充分溶解,加入氯化苄,继续搅拌反应24~48小时,再将反应液压入过滤器内,加入醋酸钠甲醇溶液,析出沉淀,静置,利用压缩空气压滤,甲醇洗涤,沉淀冷冻干燥,得到含水量低于5%、酯化率大于9的肝素苄基酯;S3:肝素苄基酯的裂解:将步骤S2中得到的肝素苄基酯充分溶解于纯化水中,搅拌,并在35~65℃下加入氢氧化钠,反应1~3小时,冷却到室温,调pH到中性,加入氯化钠,析出油状物,板框过滤,过膜,加入甲醇析出沉淀,滤板过滤,乙醇洗涤,空气压干,得沉淀物;S4:依诺肝素钠的脱色:将步骤S3中所述的沉淀物用水充分溶解,调pH到碱性,室温脱色10~20分钟,pH调回到中性,准备进行阴离子交换层析;S5:阴离子交换层析:采用阴离子交换树脂,按25‑35mg低分子肝素钠/ml‑resin上样,温度为室温,检测波长为UV232nm,上样结束后先用350~550mmol/L的氯化钠溶液洗涤,再用1~2mol/L的氯化钠溶液洗脱,洗脱终点为232nm紫外吸收降至基线平稳,收集洗脱液,检测分子量分布为重均分子量4000~4600,2000~8000分子量的比例为72‑78%;S6:冻干:酒精沉淀,除菌,冻干,得到所述的依诺肝素钠。 |