奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法

摘要

本发明涉及奶牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）的检测方法，特别涉及一种奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序（Pyrosequcing）检测方法。主要是根据Genbank已发表的BLAD CD18序列，设计针对SNP位点的特异性PCR引物和测序引物，上游引物CD18F1：5‘-GTTGCGTTCAATGTGACCTTC-3’，下游引物CD18R2：5‘-GGTCATCCACCATGGAGTAGG-3’且5’端用生物素标记，测序引物S2：5‘-TCCGGAGGGCCAAGG-3’。本发明提供的奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法具有方便、快速、敏感、稳定、特异、可靠的特点，适合BLAD CD18基因的常规检测和规模化检测。

主权项

用于奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法的引物，其特征在于，包括针对SNP位点的特异性PCR引物和测序引物，所述特异性PCR引物的序列为：上游引物CD18F1：5‘‑GTTGCGTTCAATGTGACCTTC‑3’，下游引物CD18R2：5‘‑GGTCATCCACCATGGAGTAGG‑3’，且5’端用生物素标记，测序引物S2：5‘‑TCCGGAGGGCCAAGG‑3’；使用所述上游引物和下游引物进行PCR扩增的退火温度为62℃。