一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法

摘要

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法。以白桦悬浮细胞为材料，按50g/L接种量接种于100mL B5液体培养基中，附加0.1～0.3mg/L6-BA和0.5～4.0mg/L TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L，pH5.5～6.0。在细胞悬浮培养第8天通入氢气使其终浓度为0.5-1.5mmol/L，培养12h后收获，白桦脂醇含量最高为1.11mg/gDW，是对照组185.1％。培养24h后收获，细胞内总三萜含量达到24.37mg/gDW，为对照组的181.32％。氢气具有无毒无害的优势，方便代谢产物的分离和纯化。该发明为解决天然植物药物来源紧缺和工业化大规模生产白桦三萜和白桦脂醇药物提供了一种新途径。

主权项

本发明专利提出氢气促进白桦三萜合成技术为：以白桦悬浮细胞为实验材料，按50g/L接种量接种于100mL B5液体培养基中，培养条件为：120rpm，25℃，光照强度2000lx，光周期16h，湿度40％～50％，培养周期为10d。培养基成分为B5基本培养基，附加激素及浓度为0.1～0.3mg/L6‑BA和0.5～4.0mg/L TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L，pH5.5～6.0，121℃高温高压灭菌20min。在细胞悬浮培养第8天加入富氢水使其终浓度为0.5‑1.5mmol/L，培养12至24h后收获，白桦脂醇含量最高为1.11mg/gDW，是对照组185.1％，细胞内总三萜含量达到24.37mg/gDW，为对照组的181.32％。