核酸的定量、高度多重检测

摘要

本发明提供了在多重单腔室反应中检测和定量样品中靶核酸的方法。提供了整合经优化腔室以降低高效阵列附近的信号背景的耗材，及其使用方法。本发明的特征是设置以使用所述耗材来实施所述方法的装置和系统。

主权项

一种检测样品中靶核酸的方法，所述方法包括：用具有核酸酶活性的聚合酶对所述样品进行扩增反应，所述扩增反应在包含第一探针的试剂的存在下进行，所述第一探针包含与所述靶核酸序列互补的第一部分和不与该第一靶核酸序列互补的第二部分，所述第二部分包含第一位置上的与所述第二部分偶联的第一猝灭剂部分，从而当所述靶核酸序列被扩增时，所述第二部分从所述第一部分被切下成为第一探针片段；使所述第一探针片段与固定在基材上的捕获探针杂交，其中所述捕获探针包含被所述第一猝灭剂部分至少部分猝灭的荧光团，所述荧光团偶联至所述捕获探针上的第二位置，从而在所述探针片段与所述捕获探针杂交之后，所述荧光团至少部分被所述猝灭剂猝灭；以及基于所述捕获探针上所述荧光团的猝灭来检测所述靶序列的存在。