胚胎干细胞特异性标志物Aire及其应用

摘要

本发明提供了一种新型的胚胎干细胞特异性标志物Aire及其应用。本发明以自身免疫调节因子Aire序列中由C末端的部分氨基酸序列组成的多肽偶联载体蛋白KLH作为免疫原，制备的Aire多克隆抗体，以及直接以胚胎干细胞作为免疫原制备的兔单克隆抗体Glut3和/或GM-CSFRα，作为干细胞鉴定试剂，检测的特异性和灵敏度更高，且可用于胚胎干细胞的分离和活性检测。包含上述Aire多克隆抗体、兔单克隆抗体Glut3和/或GM-CSFRα的胚胎干细胞检测试剂盒除了用于鉴定胚胎干细胞全能性以外，还可同时用于检测干细胞活性，拓展了检测试剂盒的功能。

主权项

胚胎干细胞特异性标志物Aire多克隆抗体在鉴定胚胎干细胞中的应用，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；用Aire多克隆抗体通过检测抗原抗体相互作用来鉴定胚胎干细胞，且可用于胚胎干细胞的分离和活性检测；所述Aire多克隆抗体的制备方法为：分别合成由SEQ ID No.1所示的Aire序列C末端的21个氨基酸组成的多肽以及由SEQ ID No.2所示的Aire序列C末端的12个氨基酸组成的多肽；分别将多肽偶联载体蛋白KLH，即为完全抗原；将完全抗原与完全弗氏佐剂混合，免疫新西兰大白兔；首免后，每隔两周加强免疫；四免后取全血，分离兔血清中的Aire兔多克隆抗体。