基于细胞的传感器

摘要

基于细胞的传感器。本发明涉及可用于药物发现的新型基于细胞的传感器，其包括这样的细胞系，所述细胞系具有分泌颗粒的专职调节的胞吐作用转染有作为报道分子多肽储存在具有专职调节的胞吐作用的细胞系的调节的分泌颗粒中的非蛋白酶水解酶并且具有作为调节的分泌颗粒胞吐作用的调质的内源性或异源性分子。所述颗粒储存的非蛋白酶水解酶报道分子至少具有：对所述颗粒内已存在的条件如低pH和通过其他蛋白酶的蛋白质分解的高耐受性；在胞吐作用后的酶活性；高度特异性底物；在细胞解冻时无毒性；在未被刺激或基础条件下的极低水平的分泌；和对于高通量强大且灵敏的检测在与细胞培养物生存力和颗粒胞吐作用相适合的介质中的高信号/背景活性。

主权项

基于细胞的传感器，所述基于细胞的传感器包括：a.具有分泌颗粒的调节的胞吐作用的造血细胞系；b.颗粒储存的非蛋白酶水解酶报道分子，所述非蛋白酶水解酶报道分子被转染入(a)的细胞系中并且在强组成型启动子或强诱导型启动子的控制下过表达；c.(a)的细胞系的分泌颗粒的调节的胞吐作用的内源性调质或转染的异源性调质；d.选自包含以下各项的组的细胞不可渗透底物：对分泌的非蛋白酶水解酶活性的检测特异的比色、荧光或发光底物；所述基于细胞的传感器允许测量特异性配体对调节的胞吐作用的调质的作用。