番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗

摘要

本发明公开了番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联疫苗的制备及应用，该二联疫苗以番鸭细小病毒弱毒P1株(保藏编号：CCTCC V201013)和番鸭肝白点病(番鸭呼肠孤病毒病)弱毒MWCA株(保藏编号：CGMCC 0667)为种毒，分别应用番鸭胚成纤维细胞和SPF鸡胚成纤维细胞转瓶培养技术增殖病毒，收获细胞毒液，按适当比例混合后加冻干保护剂冷冻干燥，制成二联活疫苗，在流行番鸭三周病和肝白点病的番鸭养殖地区应用。

主权项

番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗，其特征在于，所述的番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗是采用：a.来源于人工致弱的番鸭细小病毒弱毒P1株（MPV‑P1株），保藏在CCTCC，保藏日2010年6月2日，保藏编号CCTCC V201013；b.来源于人工致弱的番鸭肝白点病（番鸭呼肠孤病毒病）弱毒MWCA株(MDRV‑CA株)，该毒株保藏ＣＧＭＣＣ，保藏日2001年12月18日，保藏编号：CGMCC0667；将上述的番鸭细小病毒弱毒P1株和番鸭肝白点病（番鸭呼肠孤病毒病）弱毒MWCA株用于制备番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗；具体制备方法如下：（1）.MPV‑P1株增殖，将MPV‑P1株种毒按培养液量的1%同步接种番鸭胚成纤维细胞，37℃旋转培养至细胞病变达75%以上，收获MPV‑P1细胞毒;（2）.MDRV‑CA株增殖，将MDRV‑CA株种毒按培养液量的1%同步接种SPF鸡胚成纤维细胞（CEF），37℃旋转培养至细胞病变达75%以上，收获MDRV‑CA细胞毒；（3）.病毒含量TCID₅₀测定，MDRV‑CA和MPV‑P1的TCID50分别≥10^‑5.0/0.1ml和≥10^‑4.5/0.1ml以上时，可用于配制疫苗;（4）.疫苗配制，将MPV‑P1和MDRV‑CA按适当比例混合后加冻干保护剂冷冻干燥而成，使每羽份疫苗中各种成份的病毒含量分别达MDRV CA 10^3.5TCID₅₀和MPV‑P1 10^3.0TCID₅₀。