蝴蝶兰无菌根扩繁的方法

摘要

本发明为一种蝴蝶兰无菌根扩繁的方法，属于植物栽培领域种苗技术，具体的讲是一种红色花蝴蝶兰无菌根诱导丛生芽增殖培养成苗方法。本发明选取优良无病虫害蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2cm的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过一个月的初代诱导培养，待腋芽生长切下腋芽进行40天的生根培养，将根从腋芽处切下，接种至诱导丛生芽培养基中，20天后从切口处长出许多芽点，继续培养长出大量的芽丛，待芽丛长大后即可切下芽丛进行生根培养，则无菌根继续培养可再次得到大量丛生芽。本发明的优点是，所述的无菌根诱导丛生芽增殖获得大量丛生芽进而对蝴蝶兰进行扩繁，实现蝴蝶兰的工业化生产，通过该本发明方法极大提高繁育系数，缩短了繁育的周期，成活率可达90%以上。

主权项

一种蝴蝶兰无菌根扩繁的方法，其特征在于，包括如下步骤：   （1）选取根系较多的蝴蝶兰无菌植株，切取无菌根为外植体材料，接种到诱导丛生芽培养基上培养，15～25d后切口处长出芽点，把带芽点的根用原培养基继续进行继代培养得到大量的丛生芽，无菌根诱导丛生芽培养基为：1/2MS或MS+5～10mg/L的6‑BA+0.5～1.5mg/L的NAA+0.5～1.5mg/L的KT +25～30g/L的蔗糖+5～6.5g/L的琼脂+350～450mg/L的柠檬酸或/和维生素C或/和pvp或/和活性炭+40g/L的香蕉泥或/和马铃薯汁或/和椰子汁，pH值为5.4～5.9，培养条件为：温度为25±2℃，开始5～8d暗培养，后光照时间12～14h/d,光照强度2000～3000lux；（2）将上述诱导培养生长良好的丛生芽，从无菌根上切下接种到生根培养基中得到再生植株，生根培养基：1/2MS+0.5～1.5mg/L的NAA+25～30g/L的蔗糖+5～6.5g/L的琼脂+30～40g/L的香蕉泥+1～3g/L的活性炭，pH值为5.85～5.90，培养条件为：光照强度为2000～3000lux、光照时间为12～14h/d，培养温度为25±2℃，湿度60～80%；（3）再生植株炼苗及移栽：当试管苗长至3～4cm高，诱导出2～3条根，3～4片叶片，长度2～3cm时，进行炼苗，将试管苗带试管放在自然光下炼苗5d～6d，后取掉瓶口上的封口膜进行炼苗2d～3d，期间在叶片上喷洒水，然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，把根部用0.1%高锰酸钾浸泡4～6min后取出用滤纸吸干或自然干燥，用灭菌的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持空气湿度在80%以上。