一种测定血浆中5’-甲氧基-3’, 4’-亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺浓度的方法

摘要

本发明公开了一种测定血浆中5’-甲氧基-3’,4’-亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样品，加入一定量的有机溶媒进行萃取，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测，本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，适合于测定血浆中5’-甲氧基-3’,4’-亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺的浓度。

主权项

一种测定血浆中5’‑甲氧基‑3’,4’‑亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺浓度的方法，其特征在于，血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度，具体方法包括如下步骤：(1)血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标替硝唑溶液，加入乙酸乙酯萃取，吸取上层有机相，40℃下减压浓缩挥干，加入80v/v％甲醇水溶液溶解，离心后取上清液；(2)将步骤(1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱柱为Agilent ZOBAX SB C18，4.6×150mm，5μm；流动相：体积比为80:20的甲醇与0.2mmol·L^‑1醋酸胺水溶液；流速：400mL·min^‑1；柱温：35℃；进样量：5μL；洗脱方式为等度洗脱；(3)质谱测定：条件为：离子源：电喷雾离子化电离源ESI；离子检测方式：多反应监测；离子极性：正离子；离子源电压IS：5000V；离子源温度TEM：400℃；碰撞气CAD：10L·min^‑1；气帘气CUR：20L·min^‑1；离子源Gas1：60L·min^‑1；离子源Gas2：70L·min^‑1；检测对象的离子选择通道：5’‑甲氧基‑3’,4’‑亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺，[M+H]+，m/z278.1/205.1，DP140，EP10，CE21，CXP9；内标替硝唑，[M+H]+，m/z248.1/128.0，DP100，EP10，CE30，CXP8；(4)计算：采用内标法，以5’‑甲氧基‑3’,4’‑亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺和内标替硝唑的峰面积比值代入标准曲线方程计算5’‑甲氧基‑3’,4’‑亚甲二氧苯基桂皮酸异丁基酰胺浓度。