一种基于DNA酶催化作用的1-萘酚电化学测定方法

摘要

一种基于DNA酶催化作用的1-萘酚电化学测定方法，本发明属于分析化学和DNA生物传感器技术领域，涉及一种基于类过氧化物酶链G-DNA修饰电极在双氧水体系中催化氧化1-萘酚并实现对1-萘酚的检测。具体的以金电极为载基，将巯基修饰的含G结构的DNA修饰到电极表面，并将其浸没到含K⁺及hemin溶液的体系中使其形成具有类过氧化物酶催化活性的G-DNA结构，通过在电极表面催化双氧水氧化1-萘酚引起的阻抗变化从而实现对1-萘酚的检测。该电化学DNA生物传感器制备方法简单，检测周期短，响应时间快，稳定性好且具有高灵敏等优点。

主权项

一种基于DNA酶催化作用的1‑萘酚电化学测定方法，其特征在于包括以下步骤：1)电极的预处理与活化：将直径为1mm的金电极在鹿皮抛光布上用直径为0.05～2μm的膏状α‑Al₂O₃抛光至镜面，抛光后洗去表面污物，并依次在乙醇和超纯水中超声清洗，每次2～3min，重复三次；然后在0.1～2.0mol/L H₂SO₄溶液中经循环伏安扫描至稳定，最后用超纯水冲洗干净，氮气吹干，得到表面干净的金电极；2)G‑DNA溶液的配制：将固体G‑DNA序列用5～50mM Tris‑NaClO₄缓冲溶液溶解，用漩涡振荡器混匀，静置于室温下4h备用；3)G‑DNA修饰电极的制备：将上述步骤1)活化处理的金电极浸泡在上述步骤2)配制的G‑DNA溶液中，静置于室温下。巯基修饰的G‑DNA通过Au‑S键作用自组装于金电极表面，从而得到G‑DNA酶修饰电极。4)酶活性G‑DNA修饰电极的制备：将上述步骤3)制备的G‑DNA修饰的金电极依次浸泡在Tris‑NaClO₄缓冲溶液配制的KClO₄、hemin溶液中各1h，从而得到具有类过氧化物酶催化活性的G‑DNA修饰电极。