非巯基核酸-纳米金偶联物的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种非巯基核酸-纳米金偶联物的制备方法及其应用。该方法包括：（1）将末端含有多聚腺嘌呤PolyAx的寡核苷酸加入金纳米粒子的分散液，并加入柠檬酸钠缓冲液混合均匀、孵育，而后离心去除游离的所述寡核苷酸，而保留所述寡核苷酸与金纳米粒子的复合物；（2）将步骤（1）最终所获复合物以中性磷酸盐缓冲液重悬，再次加入所述寡核苷酸、封闭试剂以及氯化钠溶液，再次孵育，并离心除去游离的所述寡核苷酸及封闭试剂，获得所述非巯基核酸-纳米金偶联物。该方法可应用于DNA的可视化检测及制备DNA检测试剂盒。本发明制备的核酸-纳米金稳定性高，应用于核酸检测时具有快速、灵敏、动态范围宽、低成本、操作简便等优点，适于推广应用。

主权项

一种非巯基核酸‑纳米金偶联物的制备方法，其特征在于 包括：（1）将末端含有多聚腺嘌呤PolyAx的寡核苷酸加入金纳米粒子的分散液，并加入柠檬酸钠缓冲液混合均匀、孵育，而后离心去除游离的所述寡核苷酸，而保留所述寡核苷酸与金纳米粒子的复合物；（2）将步骤（1）最终所获寡核苷酸与金纳米粒子的复合物以中性磷酸盐缓冲液重悬，再次加入所述寡核苷酸、封闭试剂以及氯化钠溶液，再次孵育，并离心除去游离的所述寡核苷酸及封闭试剂，获得所述非巯基核酸‑纳米金偶联物；其中，所述封闭试剂包括dATP或巯基十一烷酸。