一种基于纳米金催化的化学发光分析检测铁蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种基于纳米金催化的化学发光分析检测铁蛋白的方法，包括以下步骤：1)纳米金溶液制备，0.01％w/w的HAuCl₄溶液加热至沸，强力搅拌下加入1％的柠檬酸钠溶液，混合溶液保持沸腾15分钟后撤掉加热源，而后不断搅拌冷却至室温，得到的溶液于4℃冰箱中保存备用；2)铁蛋白抗体对纳米金的标记，利用铁蛋白抗体修饰金纳米颗粒；3)免疫反应；4)化学发光分析检测铁蛋白，移取免疫反应完的铁蛋白抗体修饰的纳米金/铁蛋白混合液于化学发光池中，注入鲁米诺-高碘酸钾化学发光试剂，通过IFFL-D化学发光分析仪测定并记录其化学发光强度，得出化学发光强度和待测铁蛋白之间的相关关系。

主权项

一种基于纳米金催化的化学发光分析检测铁蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)纳米金溶液制备，0.01％w/w的HAuCl₄溶液加热至沸，强力搅拌下加入1％的柠檬酸钠溶液，混合溶液保持沸腾15分钟后撤掉加热源，而后不断搅拌冷却至室温，得到的溶液于4℃冰箱中保存备用；2)铁蛋白抗体对纳米金的标记，利用铁蛋白抗体修饰金纳米颗粒，具体为：将铁蛋白抗体修饰在纳米金粒子的表面，取纳米金溶液用0.1mol/L K₂CO₃溶液调节pH为9，加入铁蛋白抗体，室温搅拌作用1小时使铁蛋白抗体和金纳米粒子充分结合，于4℃温度环境下以12000转/分的速度离心30分钟，以除去未标记的抗体，吸出上清液，剩余的沉淀用0.01mol/L含有1％BSA的磷酸缓冲溶液pH7.4悬浮至原体积，于4℃冰箱中保存待用；3)免疫反应，免疫反应选用NaCl浓度为1.5×10^‑3mol/L，免疫反应时间为15‑25分钟；4)化学发光分析检测铁蛋白，移取免疫反应完的铁蛋白抗体修饰的纳米金/铁蛋白混合液于化学发光池中，注入鲁米诺‑高碘酸钾化学发光试剂，通过IFFL‑D化学发光分析仪测定并记录其化学发光强度；通过测定化学发光强度检测铁蛋白的含量，由此可以得出化学发光强度和待测铁蛋白之间的相关关系。