一种解脂耶氏酵母W₂₉脂肪酶的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种解脂耶氏酵母W₂₉脂肪酶的分离纯化方法，所述方法的具体步骤如下：(1)往含有解脂耶氏酵母W₂₉脂肪酶的发酵上清液中加入含有EDTA的饱和硫酸铵溶液，使其终饱和度为30-55％，然后调节pH至4.5-6.5，在冰上放置10h后，进行离心得到沉淀；(2)将步骤(1)得到的沉淀，进行透析除盐，得到粗酶液；(3)将步骤(2)得到的粗酶液进行低速离心，然后通过DEAE-SepharoseFF凝胶过滤层析，然后收集洗脱液，将洗脱液经PEG20000浓缩后，与甘油混合，放入-20℃下保存。本发明的解脂耶氏酵母W29脂肪酶的分离纯化方法具有操作简单，纯化倍数高和回收率高的优点。

主权项

一种解脂耶氏酵母W₂₉脂肪酶的分离纯化方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)往含有解脂耶氏酵母W₂₉脂肪酶的发酵上清液中加入含有EDTA的饱和硫酸铵溶液，使其终饱和度为30‑55％，然后调节pH至4.5‑6.5，在冰上放置10h后，进行离心得到沉淀；(2)将步骤(1)得到的沉淀，进行透析除盐，得到粗酶液；(3)将步骤(2)得到的粗酶液进行低速离心，然后通过DEAE‑SepharoseFF凝胶过滤层析，然后收集洗脱液，将洗脱液经PEG20000浓缩后，与甘油混合，放入‑20℃下保存。