一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法

摘要

一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法，属于免疫分析技术领域。本发明利用突变型沙门氏菌脂多糖（Ra-LPS）缺失了O特异性侧链的特点，采用EDC和NHS方法将LPS末端COOH与匙孔血蓝蛋白（KLH）进行偶联，免疫得到的小鼠血清对Ra-LPS和完整型LPS均有效价。用不同血清组的沙门氏菌菌体包被检测小鼠血清均有交叉反应，证明该免疫原可以用来制备沙门氏菌交叉型血清或者单克隆抗体。该免疫原的合成方法为制备沙门氏菌交叉型单克隆抗体，从而实现在菌属水平上检测沙门氏菌奠定了基础。

主权项

一种用于制备沙门氏菌交叉型抗体的免疫原的合成方法，其特征在于步骤为：取突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS 10mg，用1mL pH为4.6的0.01M 2‑吗啉代乙磺酸MES缓冲液溶解；称取0.48mg 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和0.29mg N‑羟基琥珀酰亚胺NHS，均用超纯水溶解后滴加到突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS反应溶液中，25℃反应8h；然后称取5mg 钥孔血蓝蛋白KLH并溶解于2倍于MES反应溶液体积的0.01M的碳酸盐缓冲液中，此时将活化后的突变型鼠伤寒沙门氏菌脂多糖Ra‑LPS反应液滴加到KLH溶液中，室温反应过夜，即得沙门氏菌交叉型抗体的免疫原。