检测转基因作物的微流体蛋白质芯片及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，包括基于μParaflo^TM微流体生物芯片合成的含六种核酸序列的核酸芯片以及6种抗体-寡核苷酸复合物探针，从而实现对转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1Ac）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1c）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1F）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1Ab）、大豆胰蛋白酶（SBTI）和新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因（NPTⅡ）这6种转基因蛋白的同时检测。本发明还同时提供了一种转基因检测试剂盒，包括含6种探针的μParaflo^TM微流体DNA芯片、6种抗体-寡核苷酸复合物探针和6种检测抗体等。

主权项

高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，其特征是：包括基于μParaflo^TM微流体生物芯片合成的含六种核酸序列的核酸芯片以及6种抗体‑寡核苷酸复合物探针，从而实现对转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白(Cry1Ac)、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白(Cry1c)、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白(Cry1F)、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白(Cry1Ab)、大豆胰蛋白酶(SBTI)和新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因(NPTⅡ)这6种转基因蛋白的同时检测； 所述六种核酸序列为： A：3′CAC ACG CCT TTA CGA AGA CGA T5′ B：3′CAG GTC AAA AGG GTC CTT AGG GA5′ C：3′TAG TGT GTT TCC GTT GAA AAC A5′ D：3′TAG TTG TCT GTA ATT AAC CCG CG5′ E：3′AAA CCG TTA CCA TCT TGA GTG TGG C5′ F：3′TTA ACG TGC CAT AGG TAG ACA T5′； 所述6种抗体‑寡核苷酸复合物探针中的核酸序列和相应的检测抗体为： a：5′GTG TGC GGA AAT GCT TCT GCT A3′，抗Cry1Ac兔单抗； b：5′GTC CAG TTT TCC CAG GAA TCC CT3′，抗Cry1c兔多抗； c：5′ATC ACA CAA AGG CAA CTT TTG T3′，抗Cry1Ab兔单抗； d：5′ATC AAC AGA CAT TAA TTG GGC GC3′，抗Cry1F兔多抗； e：5′TTT GGC AAT GGT AGA ACT CAC ACC G3′，抗SBTI兔多抗； f：5′AAT TGC ACG GTA TCC ATC TGT A3′，抗NPTⅡ兔单抗。