发明名称 | 一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法,以利用胶原酶对胶原蛋白的特异性降解作用对胶原酶进行酶谱分析。电泳过程中所采用的凝胶为在10%SDS-PAGE凝胶中添加质量体积比浓度为0.1%的Ⅰ型胶原蛋白。凝胶的处理过程为:电泳结束后先将凝胶用洗脱液振荡洗脱,随后用漂洗液振荡漂洗,最后将凝胶用孵育液在37℃下静置孵育12h;孵育结束后将凝胶先经考马斯亮蓝R-250染色液染色1h,再经脱色液室温振荡脱色直至透明条带清晰。该方法将Ⅰ型胶原蛋白配制到SDS-PAGE凝胶中,凝胶中Ⅰ型胶原蛋白的终浓度为0.1%,在该底物浓度下,胶原酶负染条带以及标准蛋白质标准条带能够同时在凝胶上显色,填补了胶原酶酶谱检测领域的技术空白。 | ||
申请公布号 | CN104049026A | 申请公布日期 | 2014.09.17 |
申请号 | CN201410279995.X | 申请日期 | 2014.06.23 |
申请人 | 天津商业大学 | 发明人 | 阮海华;张西轩;王素英;李晔 |
分类号 | G01N27/447(2006.01)I | 主分类号 | G01N27/447(2006.01)I |
代理机构 | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人 | 肖莉丽 |
主权项 | 一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法,包括电泳和凝胶的处理步骤,其特征在于,所述电泳过程中所采用的凝胶为在10%SDS‑PAGE凝胶中添加质量体积比浓度为0.1%的Ⅰ型胶原蛋白。 | ||
地址 | 300134 天津市北辰区津霸公路东口 |